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目的:研究金絲桃苷對疊氮鈉誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。方法:將PC12細(xì)胞與不同濃度金絲桃苷共同孵育4h后,加入20mmol·L^-1的疊氮鈉繼續(xù)孵育3~24h,觀察金絲桃苷的保護(hù)作用。采用MTT、Hoechst33342分別檢測細(xì)胞存活率和細(xì)胞形態(tài)變化。以Ac-DEVD-AMC為底物檢測caspase-3活性,CM-H2DCFDA法用于測定ROS水平。Western blotting用于分析Bcl-2和Bax表達(dá)水平。結(jié)果:金絲桃苷在0.01,0.1及1μmol·L^-1濃度時,可顯著提高疊氮鈉作用后PC12細(xì)胞的存活率,抑制細(xì)胞凋亡,減少細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基生成和caspase-3活性,提高抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá),降低促凋亡因子Bax表達(dá)。同時結(jié)果顯示caspase-3抑制劑呈時間依賴性地減少細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基含量。結(jié)論:金絲桃苷對疊氮鈉誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用,活性氧自由基生成與凋亡進(jìn)程中caspase-3活性密切相關(guān)。
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微小流量氣體的質(zhì)量流量控制是亞硝胺化學(xué)發(fā)光檢測的重要組成部分,氣體流量的控制精度對檢測結(jié)果有重要影響。文中根據(jù)反饋控制的原理,采用微型電磁比例閥、流量傳感器、數(shù)字控制電路和PID算法搭建了一套適用于微小流量場合的氣體流量控制裝置。設(shè)計了比例閥的驅(qū)動電路,傳感器的信號調(diào)理電路,微控制器電路,針對被控對象的特性對控制算法進(jìn)行了優(yōu)化。測試結(jié)果顯示,流量控制的精度優(yōu)于±0.05ml/min(標(biāo)準(zhǔn)狀況下),調(diào)節(jié)時間小于2s,基本無超調(diào)。且由于采用反饋控制,具有較好的抗干擾性能。該裝置使用方便,成本低,具有一定的實用價值。