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[目的]建立一個(gè)同時(shí)測定人血漿中煙酸及其活性代謝物煙尿酸的RP-HPLC方法,并用于臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究。[方法]取1ml人血漿于一干凈試管中,加入20μl內(nèi)標(biāo)甲硝唑,渦旋10s,再加入3ml乙腈,渦旋1min,3000rpm下離心5min,將上清全部取出置于另一干凈試管,加入3ml氯仿,渦旋5min,3000rpm下離心5min,取水溶層(上層)200μl和100μl流動(dòng)相混勻,取20μl進(jìn)樣,檢測波長為262nm。[結(jié)果]煙酸,煙尿酸和內(nèi)標(biāo)甲硝唑的保留時(shí)間為4.5min,7.5min和10.5min。煙酸和煙尿酸日內(nèi)與日間精密度的RSD均小于11%,煙酸和煙尿酸在50ng/ml到5000ng/ml范圍內(nèi)線性均良好,煙酸的其他代謝物如煙酰胺、N-甲基煙酰胺等無干擾。
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