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輔酶Q10(CoQ10)是一種脂溶性抗氧化劑,具有提高人體免疫力、延緩衰老和增強(qiáng)人體活力等功能,廣泛應(yīng)用于制藥行業(yè)和化妝品行業(yè)。微生物發(fā)酵法能可持續(xù)性生產(chǎn)輔酶Q10,具有越來越多的商業(yè)價(jià)值。本研究首先將來自類球紅細(xì)菌的十聚異戊二烯焦磷酸合成酶基因(dps)整合到大腸桿菌ATCC 8739染色體上,敲除內(nèi)源的八聚異戊二烯焦磷酸合成酶基因(ispB),使內(nèi)源的輔酶Q8合成途徑被輔酶Q10合成途徑取代,得到穩(wěn)定生產(chǎn)輔酶Q10的菌株GD-14,其輔酶Q10產(chǎn)量達(dá)0.68 mg/L,單位細(xì)胞含量達(dá)0.54 mg/g DCW。隨后用多個(gè)固定強(qiáng)度調(diào)控元件在染色體上對(duì)MEP途徑的關(guān)鍵基因dxs和idi基因以及ubiCA基因進(jìn)行組合調(diào)控,將輔酶Q10單位細(xì)胞含量提高2.46倍(從0.54到1.87 mg/g)。進(jìn)一步引入運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌Zymomonas mobilis的Glf轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白代替自身的磷酸烯醇式丙酮酸:碳水化合物磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(PTS),使輔酶Q10產(chǎn)量進(jìn)一步提高16%。最后,對(duì)高產(chǎn)菌株GD-51進(jìn)行分批補(bǔ)料發(fā)酵,輔酶Q10產(chǎn)量達(dá)433 mg/L,單位細(xì)胞含量達(dá)11.7 mg/g DCW。這是目前為止文獻(xiàn)報(bào)道的大腸桿菌產(chǎn)輔酶Q10最高菌株。