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更新時(shí)間：2024.12.28
新疆紫穗槐中總黃酮的提取與含量測(cè)定

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用超聲波輔助乙醇溶液浸提法和索氏提取法提取新疆地方植物藥材紫穗槐中黃酮化合物并進(jìn)行含量測(cè)定。以蘆丁為對(duì)照品,NaNO2-Al(NO3)3-NaOH體系為顯色劑,利用分光光度法在510nm處測(cè)定提取物中的總黃酮的含量。校準(zhǔn)曲線為A=11.825C-0.0139,r=0.9992。超聲提取法所得總黃酮的含量以蘆丁計(jì)算為2.3562%,索氏提取法所得總黃酮的含量以蘆丁計(jì)算為2.6375%,平均回收率分別為102.16%和96.53%。索氏提取法的提取優(yōu)于超聲波輔助乙醇浸提法,該法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確,可用于新疆紫穗槐果實(shí)總黃酮的測(cè)定。

紫穗槐-4,11-二烯合酶及其代謝工程研究進(jìn)展

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紫穗槐-4,11-二烯合酶催化FPP(farnesyl pyrophosphate,法尼基焦磷酸)生成青蒿素前體紫穗槐-4,11-二烯,是青蒿素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶。本文對(duì)紫穗槐-4,11-二烯合酶的分子生物學(xué)和代謝工程研究進(jìn)行了綜述。紫穗槐-4,11-二烯合酶編碼基因及其相關(guān)核酸序列已經(jīng)得到了克隆。紫穗槐-4,11-二烯合酶cDNA全長(zhǎng)1641bp,編碼546aa。紫穗槐-4,11-二烯合酶最適pH范圍較寬,但需要二價(jià)金屬離子作為輔酶才能發(fā)揮作用,其產(chǎn)物和底物的特異性不高。在紫穗槐-4,11-二烯合酶作用下,FPP首先進(jìn)行的是1,6-合環(huán),然后是1,10-合環(huán),形成紫穗槐-4,11-二烯。由于紫穗槐-4,11-二烯合酶在青蒿素生物合成中具有重要的意義,自從其基因被克隆測(cè)序后,先后被導(dǎo)入E.coli、S.cereviseae、煙草、擬南芥和A.nidulans,獲得了能產(chǎn)生紫穗槐-4,11-二烯的各種工程菌或細(xì)胞,研究通過(guò)不同方式提高工程菌中紫穗槐-4,11-二烯產(chǎn)量的方法。

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