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針對芝麻Sesamum indicum2S albumin mRNA基因設(shè)計(jì)引物、探針,在實(shí)時(shí)熒光PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增、檢測和分析.結(jié)果顯示:該組探針和引物對芝麻有很強(qiáng)的特異性,除黑芝麻和白芝麻外,其余6種對照材料均未檢測到熒光信號(hào),黑白芝麻成分檢測靈敏度達(dá)到0.1%.該方法具有靈敏度高、快速、簡便的特點(diǎn),可用于芝麻致敏原成分的定量檢測.
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目的建立應(yīng)用Allglo探針同時(shí)檢測GI和GII型諾如病毒的雙重?zé)晒夥崔D(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法。方法設(shè)計(jì)針對GI和GII型諾如病毒開放閱讀框架ORFl及ORF2為目的基因的引物和Allglo探針,優(yōu)化最佳反應(yīng)條件,建立一步法熒光RT-PCR快速檢測反應(yīng)體系;對該方法的特異性、抗干擾性、靈敏度進(jìn)行評(píng)估,對96份臨床糞便標(biāo)本進(jìn)行檢測、測序分析。結(jié)果該方法特異性強(qiáng),與輪狀病毒、扎如病毒、星狀病毒、腺病毒同時(shí)檢測無交叉反應(yīng);同一體系下GI或GII型諾如病毒相互之間沒有干擾;最低檢測限均為10 copies/μL;對96份臨床糞便標(biāo)本進(jìn)行檢測,結(jié)果與單重?zé)晒釸T-PCR方法符合率100%,且測序結(jié)果顯示目標(biāo)序列正確。結(jié)論本研究建立的Allglo探針法檢測GI和GII型諾如病毒技術(shù)特異性好,靈敏度高,可用于感染性腹瀉暴發(fā)中諾如病毒的快速篩查。
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