蝴蝶蘭原生質體提取方法的優(yōu)化
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以蝴蝶蘭自交品種NOⅡ的無菌苗葉片為試材,采用單因素試驗和正交試驗,比較不同酶的種類、酶液濃度、材料和酶液的比例、滲透壓、酶解時間及純化條件對原生質體產量和活性的影響,并用熒光顯微鏡觀察去壁情況。結果表明:在同一種條件下1 g蝴蝶蘭葉片加入10 mL酶解液中,酶解液含1.0%纖維素酶R-10,1.0%果膠酶,0.5 mol·L~(-1)甘露醇,酶解3 h,有活力的原生質體產量最高,其產量為1.3×10~5個·g~(-1),活性達81.90%。
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