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為了建立基于QPCR的快速方法檢測(cè)米飯中產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌,首先采用煮沸法提取蠟樣芽孢桿菌基因組DNA,并利用普通PCR方法驗(yàn)證引物特異性,然后通過(guò)在米飯樣品中添加目標(biāo)菌,模擬受污染的實(shí)際樣本,用QPCR技術(shù)定量檢測(cè)米飯中產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌。結(jié)果表明該方法具有快速、特異性強(qiáng)、靈敏度高和穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn),能對(duì)產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌定量。不經(jīng)過(guò)增菌培養(yǎng),實(shí)際樣品的檢測(cè)限為9.8×101CFU/g;經(jīng)過(guò)2 h的增菌培養(yǎng),檢測(cè)限能達(dá)到100CFU/g;并且米飯中添加其他雜菌后,不影響對(duì)蠟樣芽孢桿菌的檢測(cè)。建立的QPCR方法適用于米飯等相關(guān)淀粉類(lèi)食品中產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌的檢測(cè),從而為監(jiān)測(cè)該菌所致食品污染以及早期相關(guān)食物中毒提供快速定量檢測(cè)方法。
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