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更新時間：2025.03.15
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為了研究PCR擴(kuò)增的最適條件，以GRG受體第二外顯子基因?yàn)閷ο?，觀察了影響PCR反應(yīng)的因素．研究結(jié)果表明：最佳變性溫度為92℃與94℃；最適的退火溫度為58℃；最適的引物濃度為0.6，0．8μmol；以1．0U酶量結(jié)果最滿意，最適dNTP濃度為100～150μmol／L，最適的鎂離子濃度為2．0mmol／L；最佳循環(huán)次數(shù)為35個循環(huán)；該文可為希望引入PCR作為診斷實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室提供有用的信息．
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從GenBank上調(diào)取刺參C型凝集素(C-type Lectin)基因序列EST,根據(jù)此序列設(shè)計(jì)RACE引物,采用PCR擴(kuò)增技術(shù)得到了仿刺參C-type Lectin基因序列(EST),根據(jù)這段EST序列設(shè)計(jì)1個基因特異引物(GSPF),與通用引物(UPM)擴(kuò)增,成功地克隆到了該基因的3’末端序列.同時,對仿刺參C型凝集素基因3’克隆的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化.該擴(kuò)增片段長度為670bp,與已知序列重疊部分為417bp.經(jīng)測序和比對發(fā)現(xiàn)該段序列與預(yù)期的目標(biāo)基因的序列一致.
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基因擴(kuò)增儀
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