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[目的]研究杜仲葉水提物對自由基所致的肝線粒體損傷的保護作用。[方法]采用硫代巴比妥酸比色法測定丙二醛含量、分光光度法測線粒體的腫脹度,并以還原型輔酶I-氮藍四唑-吩嗪硫酸甲酯為超氧陰離子生成系統(tǒng)測定對超氧陰離子的清除能力。小鼠背部注射D-半乳糖50d后,利用試劑盒測定杜仲葉水提物對小鼠肝臟超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和抗羥自由基活性的影響。[結果]杜仲葉水提物可減輕肝臟的損傷,抑制線粒體腫脹,具有清除超氧陰離子,增強抗氧化酶的活性。[結論]該研究為杜仲葉資源的開發(fā)與應用提供了科學依據。
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目的:探討葛根素對MPP+誘導SH-SY5Y細胞損傷的保護機制。方法:臺盼藍染色檢測細胞存活率;PI單染流式細胞術分析細胞凋亡率、細胞周期分布;ELISA和Western blotting法檢測胞漿Cyt C的變化;ELISA方法檢測Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9酶活性;DNA ladder分析藥物對細胞凋亡的干預作用。結果:在12.550μmol.L-1,葛根素對MPP+誘導的SH-SY5Y細胞損傷具有一定的保護作用,并呈一定的量效關系;PI單染流式細胞術檢測結果顯示MPP+誘導SH-SY5Y細胞發(fā)生凋亡,并阻滯細胞于G2/M期,預先加入不同劑量的葛根素可以逆轉MPP+對SH-SY5Y細胞損傷作用。West-ern blotting和ELISA分析結果均顯示葛根素能夠抑制MPP+誘導SH-SY5Y細胞的Cyt C的釋放。不同劑量的葛根素也能夠抑制MPP+誘導SH-SY5Y細胞的Caspase-3和Caspase-9的活性,但對Caspase-8的活性影響不明顯;DNAladder分析也顯示葛根素可以抑制MPP+誘導SH-SY5Y細胞凋亡。結論:葛根素可以提高MPP+誘導的SH-SY5Y損傷的細胞存活率,抑制細胞凋亡的發(fā)生,其機制可能與調節(jié)線粒體Caspase通路和干預細胞周期有關。