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文章結(jié)合我省室內(nèi)養(yǎng)護技術(shù) ,針對花后栽培成活率低這一中心主題 ,總結(jié)出西洋杜鵑的生長習性 ,高寒地區(qū)蒔養(yǎng)杜鵑的影響因素及栽培管理方法 ,從而進一步提高杜鵑的觀賞價值和栽培技術(shù)
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以西洋杜鵑(Rhododendron hybridum)葉片提取的基因組DNA為材料,用引物UBC880(序列為GGA GAG GAG AGGAGA)研究了PCR反應體系的主要成分及退火溫度對該種植物ISSR擴增結(jié)果的影響。確立了可用于西洋杜鵑ISSR-PCR分析的最適宜的PCR反應體系:20μL PCR反應體積中,含10 ng模板DNA,0.25 mmol.L-1 dNTPs,2.0 mmol.L-1 Mg2+,1.0U Taq DNA聚合酶,0.4μmol.L-1引物,并確定引物UBC 880的最適退火溫度為54.4℃。PCR擴增程序:94℃預變性5 min,94℃變性45 s,54.4℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,共40個循環(huán)后,72℃延伸7 min,4℃保存。應用該ISSR體系對11份西洋杜鵑種質(zhì)進行了擴增,證實了該體系的適用性和穩(wěn)定性。
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