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目的建立TaqMan探針熒光定量PCR檢測方法,用于臨床標本中尖孢鐮刀菌的快速診斷。方法針對尖抱鐮刀菌的B—tubulin基N。設計特異性引物和探針并構建該基N的重組質粒標準品;優(yōu)化PCR反應條件,建立尖孢鐮刀菌的熒光定量PCR檢測方法;通過lO種標準菌株和33株,臨床分離株的應用檢測,驗證該方法的可行性。結果該檢測方法具有較好的特異度、敏感度和重復性,6襪尖孢鐮刀茵均有明顯擴增,而其它37株臨床常見的致角膜炎真菌標準株或分離株無明顯擴增;最低檢出限為408copies/μl,且變異系數(shù)低于5%。結論研究成功建立了尖孢鐮刀菌的TaqMan探針熒光定量PCR檢測方法,對臨床上真菌性角膜炎的快速診斷及指導用藥具有實際應用性和重要意義。
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