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更新時間:2024.12.28
紫葉李葉片總RNA提取方法的改進與比較

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從紫葉李葉片中提取高質(zhì)量RNA是研究葉色相關基因表達調(diào)控的必要前提。實驗室常用的RNA提取方法和RNA提取試劑盒有很多種,每種方法只適合某些組織材料。對彩葉植物來說,組織中的次生代謝物含量很高,葉片中的花色素苷、多糖更是高質(zhì)量核酸提取過程中難以去除的干擾成分。本文利用CTAB法、SDS法以及Trizol法從富含花青素類物質(zhì)的彩葉植物紫葉李葉片中提取總RNA。電泳檢測顯示:CTAB法提取的總RNA其28S、18S條帶清晰,紫外光譜分析A260/A280比值為1.93,A260/A230比值為2.04,RNA產(chǎn)量可達141μg·g-1·FW-1;而且通過RT-PCR擴增出了目的基因的cDNA片段,說明利用此法分離的RNA純度和濃度符合反轉錄PCR的要求,而且能去除色素分子的干擾。SDS法提取的總RNA產(chǎn)量較低,且純度不高。而Trizol法很難從紫葉李中提出完整的RNA。因此CTAB法是一種從富含花青苷的紫葉李葉片中有效提取高質(zhì)量總RNA的方法。

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