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建立非洲木薯花葉病毒(African cassava mosaic virus,ACMV)靈敏快速的納米磁珠實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)技術(shù),防止其傳入中國(guó)。采用TaqMan探針結(jié)合納米磁珠(magnetic nanoparticles,MNPs)技術(shù),以外殼蛋白基因?yàn)槟繕?biāo)基因,通過(guò)特異性及靈敏度試驗(yàn)建立MNP熒光PCR檢測(cè)方法。成功建立了非洲木薯花葉病毒(ACMV)的MNP熒光PCR檢測(cè)方法;該方法檢測(cè)閾值約為13pg DNA,比普通PCR及ELISA方法靈敏度高25倍;該方法具有良好的特異性,能夠有效區(qū)分雙生病毒屬的ACMV、棉花曲葉病毒(CLCuV)、番茄黃化曲葉病毒(TYLCV)及番茄嚴(yán)重曲葉病毒(ToSLCV)。MNP熒光PCR方法能夠快速靈敏的檢測(cè)莖葉樣品中的ACMV,無(wú)需任何PCR后處理,交叉污染風(fēng)險(xiǎn)小,適于口岸檢驗(yàn)檢疫。
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