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構(gòu)建了用于微流控細胞分析芯片的發(fā)光二極管(LED)誘導透射式熒光檢測微系統(tǒng),以克服現(xiàn)有熒光檢測系統(tǒng)體積大、能耗高,以及激發(fā)光光路、檢測區(qū)域和熒光收集光路間光學耦合效率低等問題。該系統(tǒng)的激發(fā)光光路和熒光收集光路互成135°,LED發(fā)出的激發(fā)光經(jīng)透鏡聚焦和激發(fā)光濾色片濾光后,經(jīng)直徑為200μm的小孔光闌限束,然后投射到微流控芯片通道末端的檢測區(qū)域;產(chǎn)生的熒光及雜散光經(jīng)加工后置于微流控芯片底部的發(fā)射光高通干涉濾色薄膜后,被光電倍增管收集。以HepG2肝癌細胞為測試樣本對該熒光檢測微系統(tǒng)的有效性進行了評測,結(jié)果顯示:當LED工作電流為200mA,PMT控制電壓為3.5V時,可產(chǎn)生與背景噪聲明顯區(qū)分的峰值信號;用250s觀測時間得到了8個平均峰高為0.7V的峰值信號,與熒光顯微鏡觀察結(jié)果一致,實現(xiàn)了細胞的在線計數(shù)檢測功能。提出的系統(tǒng)為新型微全細胞分析提供了一種新的技術(shù)途徑。
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