M238血?dú)夥治鰞x配套使用試劑

化學(xué)姐說

斐林試劑和班氏試劑都是檢驗(yàn)還原性糖的試劑，二者的使用成分原理、及保存方法有區(qū)別；還原糖的鑒定于蛋白質(zhì)的鑒定所使用的斐林試劑和雙縮脲試劑成分相同，但二者的使用方法及原理也不盡相同。下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結(jié)。（馬上點(diǎn)標(biāo)題下“高中生物”關(guān)注可獲得更多知識(shí)干貨，每天更新喲?。?/p>

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斐林試劑和班氏試劑

（1）成分不同：班氏試劑的配置方法： 400mL水中加85g檸檬鈉和50g無水碳酸鈉；50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。制成CuSO4溶液；把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液-Na2CO3溶液中，邊加邊攪，如產(chǎn)生沉淀可濾去。斐林試劑的配置為：斐林試劑甲液為0.1 g/mLNaOH的溶液。乙液為0.05 g/mL CuSO4的溶液。使用時(shí)，將4～5滴乙液滴入2 mL甲液中，混合后立即使用

（2）原理不同：檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強(qiáng)堿弱酸鹽，在水中它們均可水解產(chǎn)生OH-，與檸檬酸鈉-Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合時(shí)，Cu2+和OH-結(jié)合，生成Cu(OH)2與葡萄糖中的醛基（-CHO）反應(yīng)生成磚紅色沉淀。而斐林試劑則是CuSO4于NaOH發(fā)生反應(yīng)生成Cu(OH)2。當(dāng)然，無論用班氏試劑還是斐林試劑，歸根結(jié)底都是Cu(OH)2與醛基（-CHO）在沸水浴加熱條件下反應(yīng)而生成磚紅色的Cu2O沉淀，兩者反應(yīng)現(xiàn)象一樣，這就是二者的相同之處。

（3）保存方式不同：斐林試劑甲和斐林試劑乙可產(chǎn)生較多地Cu(OH)2，很容易沉淀析出，因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配；而班氏試劑的配方中，檸檬酸鈉為-Na2CO3一對(duì)緩沖物質(zhì)，產(chǎn)生的OH-數(shù)量有限，與溶液混合后產(chǎn)生的Cu(OH)2濃度相對(duì)較低，不易析出，因此該試劑可長期保存。

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斐林試劑和雙縮脲試劑

（1）濃度不同：斐林試劑甲為0.1 g/mL NaOH溶液，斐林試劑乙液為濃度為0.05 g/mL的CuSO4；雙縮脲試劑A為0.1 g/mL NaOH溶液（與斐林試劑甲完全相同），雙縮脲試劑B為0.01 g/mL的CuSO4溶液（與斐林試劑乙液濃度不同）

（2）使用原理不同：斐林試劑是新配制的Cu(OH)2溶液，它在加熱條件下與醛基反應(yīng)，被還原成磚紅色的Cu2 O沉淀，可用于鑒定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí)，溶液的顏色變化過程為：淺藍(lán)色→棕色→磚紅色（沉淀）。

鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí)，使用的是雙縮脲試劑，發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng)。雙縮脲反應(yīng)實(shí)質(zhì)是在堿性環(huán)境下Cu2+的與雙縮脲試劑發(fā)生的紫色反應(yīng)。而蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲(H2NOC-NH-CONHH2)結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)，可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。

（3）使用方法不同：斐林試劑使用時(shí)，先將NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合，而后立即使用；雙縮脲試劑使用時(shí)，先加入NaOH溶液（2mL），振蕩搖勻，造成堿性的反應(yīng)環(huán)境，然后再加入3~4滴CuSO4溶液，振蕩搖勻后觀察現(xiàn)象。如果混合后使用或者次序顛倒，則過多的Cu2+（藍(lán)色）使溶液生成的紫色被掩蓋，實(shí)驗(yàn)效果不容易觀察。

練習(xí)題目：

（2017年新課標(biāo)Ⅰ，2）下列關(guān)于細(xì)胞結(jié)構(gòu)與成分的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）

A. 細(xì)胞膜的完整性可用臺(tái)盼藍(lán)染色色法進(jìn)行檢測

B. 檢測氨基酸的含量可用雙縮脲試劑進(jìn)行顯色

C. 若要觀察處于細(xì)胞分裂中期的染色體可用醋酸洋紅液染色

D. 斐林試劑是含有Cu2+的堿性溶液，可被葡萄糖還原成磚紅色

應(yīng)試技巧：