塑料棚肉雞養(yǎng)殖大腸桿菌病防治

大腸桿菌多價工程疫苗對孕母豬免疫效力高

介紹了大腸桿菌耐熱腸毒素b(stb)的編碼基因、理化性質(zhì)、免疫學(xué)特征、分泌特征、毒性相關(guān)氨基酸殘基、空間結(jié)構(gòu)、膜受體以及stb致動物腹瀉的機(jī)理。認(rèn)為stb是一種十分重要的腸毒素,應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)對stb及其致腹瀉機(jī)理的研究。

輔酶q10(coq10)是一種脂溶性抗氧化劑,具有提高人體免疫力、延緩衰老和增強(qiáng)人體活力等功能,廣泛應(yīng)用于制藥行業(yè)和化妝品行業(yè)。微生物發(fā)酵法能可持續(xù)性生產(chǎn)輔酶q10,具有越來越多的商業(yè)價值。本研究首先將來自類球紅細(xì)菌的十聚異戊二烯焦磷酸合成酶基因(dps)整合到大腸桿菌atcc8739染色體上,敲除內(nèi)源的八聚異戊二烯焦磷酸合成酶基因(ispb),使內(nèi)源的輔酶q8合成途徑被輔酶q10合成途徑取代,得到穩(wěn)定生產(chǎn)輔酶q10的菌株gd-14,其輔酶q10產(chǎn)量達(dá)0.68mg/l,單位細(xì)胞含量達(dá)0.54mg/gdcw。隨后用多個固定強(qiáng)度調(diào)控元件在染色體上對mep途徑的關(guān)鍵基因dxs和idi基因以及ubica基因進(jìn)行組合調(diào)控,將輔酶q10單位細(xì)胞含量提高2.46倍(從0.54到1.87mg/g)。進(jìn)一步引入運(yùn)動發(fā)酵單胞菌zymomonasmobilis的glf轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白代替自身的磷酸烯醇式丙酮酸:碳水化合物磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(pts),使輔酶q10產(chǎn)量進(jìn)一步提高16%。最后,對高產(chǎn)菌株gd-51進(jìn)行分批補(bǔ)料發(fā)酵,輔酶q10產(chǎn)量達(dá)433mg/l,單位細(xì)胞含量達(dá)11.7mg/gdcw。這是目前為止文獻(xiàn)報道的大腸桿菌產(chǎn)輔酶q10最高菌株。

乙醇酸（glycolate）是一種在工業(yè)上有多種用途的重要化合物。本研究首先在大腸桿菌mg1655（de3）中敲除了ldha（乳酸脫氫酶）,獲得菌株mgly1,作為出發(fā)菌株。然后通過調(diào)節(jié)乙醇酸合成途徑的關(guān)鍵酶——異檸檬酸裂解酶（acea）、乙醛酸還原酶（ycdw）、異檸檬酸脫氫酶激酶/磷酸化酶（acek）的表達(dá)水平,得到乙醇酸產(chǎn)率為0.24g/g葡萄糖（占理論產(chǎn)率的28.2%）。過量表達(dá)檸檬酸合成酶（glta）,乙醇酸產(chǎn)率提高到0.326g/g葡萄糖（占理論產(chǎn)率的38.3%）。然后在mgly1中敲除了glcb和aceb（蘋果酸合成酶）,減少了乙醇酸合成的前體乙醛酸的消耗。最終獲得的工程菌株mgly335乙醇酸產(chǎn)率達(dá)到0.522g/g葡萄糖（占理論產(chǎn)率的61.4%）。

遼寧省益康生物制品廠與解放軍軍需大學(xué)合作聯(lián)合研制成功“仔豬大腸桿菌st_1—lt_b雙價基因工程菌苗”。該苗是利用基因工程技術(shù)將大腸桿菌腸毒素st_1—lt_b分別克隆、測序后融合到一起插入質(zhì)粒載體

近幾年來，中赤鄉(xiāng)乃至武平縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)戶中仔豬黃痢病的發(fā)病率、死亡率均較高，尤其是農(nóng)村中母豬舍簡陋、衛(wèi)生條件差的，黃痢病的發(fā)病率常達(dá)50％，死亡率高達(dá)30％。為尋求防治黃痢病的有效措施和辦法，我站從1997年10月份起至1998年2月，應(yīng)用哈獸研所生產(chǎn)的“豬大腸桿菌k8...

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(etec)引起新生幼畜(仔豬、犢牛、羔羊等)腹瀉在國內(nèi)外都很普遍,是導(dǎo)致幼畜死亡的主要原因之一。etec具有兩類致病因子:一種為腸毒素,即不耐熱性腸毒素(lt)和耐熱性腸毒素(st)。另一種為粘著素(定居因子),已知的粘著素抗原有k88、k99、987p、f41和f42等。etec借助這些粘著素定居于腸道粘膜的上皮細(xì)胞上,在那里大量繁殖,并產(chǎn)生大量腸毒素,導(dǎo)致幼畜發(fā)病。據(jù)國內(nèi)統(tǒng)計(jì)資料表明,幼畜大腸桿菌性腹瀉在腹瀉中的比例,豬為35％,牛為26％,羊?yàn)?7％,其死亡率在10～30％左右,流行面廣,死亡率高,即便幸免于死的幼畜亦常生長滯緩,難以育肥,造成很大經(jīng)濟(jì)損失,對家畜飼養(yǎng)業(yè)危害甚大。加上近幾年抗藥菌株大量增加,致使治

通過在au納米顆粒表面修飾辣根過氧化酶(hrp)標(biāo)記的大腸桿菌抗體制備了一種新型的au納米標(biāo)記物,并將該納米標(biāo)記物應(yīng)用于增強(qiáng)電化學(xué)免疫分析大腸桿菌.經(jīng)過酶聯(lián)免疫反應(yīng)后,au納米標(biāo)記物、免疫磁性顆粒(imb)和大腸桿菌形成了imb/抗體-大腸桿菌-au納米標(biāo)記物的三明治式免疫復(fù)合物.以3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯二胺(tmb)溶液作為底物,采用電化學(xué)與流動注射檢測(fia)相結(jié)合的技術(shù)測定hrp的活性.檢測到的電流大小與免疫復(fù)合物上hrp的量成正比,從而與大腸桿菌的濃度成正比.au納米顆粒增加了hrp的負(fù)載量,增強(qiáng)了電化學(xué)信號,大大提高了大腸桿菌的檢測靈敏度.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大腸桿菌濃度在1.0×102～5.0×104cfu·ml-1范圍內(nèi)與電流大小成線性相關(guān),最低檢測限達(dá)50cfu·ml-1,若對大腸桿菌樣品溶液進(jìn)行預(yù)濃縮,將得到更寬的檢測范圍和更低的檢測限.本方法總的分析時間比其他方法短,在1h內(nèi)就能完成對大腸桿菌樣品的快速檢測.

羔羊是嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)的一種高發(fā)病。根據(jù)對新疆兵團(tuán)十三個師（局）1995年的疫情調(diào)查統(tǒng)計(jì)，全兵團(tuán)羔羊發(fā)病16．64萬只，發(fā)病率14．80％；死亡9．11萬只，死亡率8．10％，該病目前是危害養(yǎng)羊生產(chǎn)的重點(diǎn)疫病。為了探討基因工程苗防治該病的可行性，我們進(jìn)行了羔羊大腸桿...

采用由遼寧省益康生物制品廠提供的仔豬大腸桿菌基因工程st1—ltb雙價滅活疫苗對臨產(chǎn)前30天、體重相近的妊娠母豬143頭進(jìn)行了應(yīng)用效果觀察。結(jié)果表明,在臨產(chǎn)前25天和15天分別頸部肌肉注射該

通過在大腸桿菌(escherichiacoli)中過量表達(dá)來自加州月桂(umbellulanacalifornia)的硫酯酶基因bte,極大地加強(qiáng)了大腸桿菌中碳脂肪酸(mcfas)的生產(chǎn)。并對mcfas在大腸桿菌胞內(nèi)外的分布,以及是否對大腸桿菌細(xì)胞膜磷脂組成產(chǎn)生影響等進(jìn)行了系統(tǒng)的分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn),產(chǎn)生的mcfas絕大部分存在于大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),且未對其細(xì)胞膜磷脂組成產(chǎn)生明顯影響。為了繼續(xù)提高mcfas的產(chǎn)量,又進(jìn)一步對大腸桿菌進(jìn)行了代謝工程改造,通過結(jié)合表達(dá)乙酰-coa羧化酶(accase),優(yōu)化硫酯酶的表達(dá)水平等,最終獲得了188.9mg/l的總mcfas產(chǎn)量,并且產(chǎn)生的mcfas的比例高達(dá)85%以上,實(shí)現(xiàn)了mcfas的高特異性生產(chǎn)。

中國農(nóng)科院哈爾濱獸醫(yī)研究所陳章水研究員等,應(yīng)用基因工程技術(shù)研制成大腸桿菌k_(88)k_(99)雙價基因工程苗。用該苗后海穴接種7頭妊娠母豬,分娩后用強(qiáng)毒攻擊53頭仔豬,保護(hù)率為90.6％(48/53);皮下接種5頭妊娠母豬,分娩后用強(qiáng)毒攻擊47頭仔豬,保護(hù)率為72.3％(34/47);從而證

對妊娠14~16周母豬頸部肌肉注射仔豬大腸桿菌k88-st1-ltb三價基因工程滅活疫苗(以下簡稱三價滅活苗)的結(jié)果表明:三價滅活苗可以大大降低仔豬大腸桿菌的發(fā)病率和死亡率,差異極顯著(p<0.01);對仔豬生長安全、無副作用;三價滅活苗的使用效果明顯優(yōu)于仔豬大腸桿菌k88-k99雙價基因工程滅活疫苗(以下簡稱雙價滅活苗);疫苗現(xiàn)場應(yīng)用免疫保護(hù)率明顯高于雙價滅活苗,差異極顯著(p<0.01)。

仔豬大腸桿菌K88ac-ST_1-LT_B三價基因工程滅活苗 Ⅳ.保存期試驗(yàn)和田間試驗(yàn)

仔豬大腸桿菌K88_(ac)-ST_1-LT_B三價基因工程滅活苗 Ⅲ.實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)與檢驗(yàn)

蘇云金芽胞桿菌菌粉、玉米淀粉與線性低密度聚乙烯共混制得淀粉塑料,通過地埋降解和搖床快速降解試驗(yàn)研究了淀粉塑料中淀粉的降解率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)地埋降解120d后含5%菌粉和50%淀粉的薄膜淀粉降解率達(dá)到89.52%,掃描電鏡觀察大部分淀粉顆粒破碎,出現(xiàn)許多小孔。不加菌粉的淀粉降解率只35.48%,表明添加的菌粉對淀粉降解有明顯的促進(jìn)作用

不同濃度bt粉劑藥液防治春尺蠖不同齡期幼蟲試驗(yàn)結(jié)果表明:200倍液濃度10d后防效達(dá)到了100%,是防治春尺蠖幼蟲最理想的濃度。300倍液濃度防效更正減退率達(dá)到97%,根據(jù)各地地理?xiàng)l件、氣候條件、蟲口密度等,也可采用300倍液濃度進(jìn)行防治。

用大腸桿菌k99、f41基因工程菌毛苗對1500頭懷孕母牛皮下注射菌毛苗5mg/頭,局部和全身均無任何不良反應(yīng),未造成母牛流產(chǎn)、早產(chǎn)及犢牛畸形,無任何毒副作用。對菌毛苗主動免疫的懷孕母牛所產(chǎn)犢牛吃初乳后用強(qiáng)毒k99、f41大腸桿菌攻擊,保護(hù)率達(dá)90%,證明該菌毛苗具有較強(qiáng)的k99和f41免疫原性,可使?fàn)倥＋@得確實(shí)的被動免疫。在5個牛場對1480頭犢牛進(jìn)行菌毛苗免疫效果觀察,未免疫對照組腹瀉發(fā)病率為

將檢測抗體(dab)和二茂鐵甲酸(fca)固載于二氧化硅修飾的氧化鋅(zno@sio2)表面制備納米復(fù)合材料標(biāo)記物({dab-zno-fca}),并將其用于放大電化學(xué)免疫分析乳制品中大腸桿菌(escherichiacoli)。采用"三明治"免疫分析模式,基于二茂鐵甲酸產(chǎn)生的電流信號與大腸桿菌濃度之間的關(guān)系實(shí)現(xiàn)了對大腸桿菌的檢測。結(jié)果表明,二茂鐵甲酸產(chǎn)生的電流信號與大腸桿菌濃度的對數(shù)在2.0×102~2.0×106cfu/ml范圍內(nèi)保持良好的線性關(guān)系,檢出限為100cfu/ml(s/n=3)。利用該電化學(xué)免疫分析方法對乳制品進(jìn)行了大腸桿菌的加標(biāo)回收試驗(yàn),回收率在95.8%~105%之間。

仔豬大腸桿菌K88ac—ST1—LTB三價基因工程滅活苗的研究

據(jù)報道，日本科學(xué)技術(shù)振興機(jī)構(gòu)等研究人員利用大腸桿菌，通過轉(zhuǎn)基因操作和光反應(yīng)等方法，制造出400℃左右高溫下也不會變形的生物塑料。而此前生物塑料的最高耐熱溫度是305℃。

利用蘇云金桿菌防治八角尺蠖見成效