氨基酸等電點

在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，成為兼性離子，呈電中性，此時的溶液pH稱該氨基酸的等電點。

氨基酸等電點基本信息

中文名 氨基酸等電點 外文名 Isoelectric point of amino acids
p????h 稱該氨基酸的等電點。 定????義 氨基酸凈電荷為零時的pH值
計算公式 pI=1/2（pKa1+PKa2）

1、對于側(cè)鏈R基不解離的中性氨基酸來說，pI=1/2（pKa1 PKa2）。

2、對于有多個解離基團(tuán)的氨基酸來說，只要寫出它的解離公式，然后取等電兼性離子兩邊的pKa的平均值則得出其pI值。

注：pI值與該離子濃度基本無關(guān)，只取決于等電中性離子A0兩側(cè)的pK值。

氨基酸等電點造價信息

市場價 信息價 詢價
材料名稱 規(guī)格/型號 市場價
（除稅）		 工程建議價
（除稅）		 行情 品牌 單位 稅率 供應(yīng)商 報價日期
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信息價		 含稅
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甘氨酸5.97

丙氨酸6.00

纈氨酸5.96

亮氨酸5.98

異亮氨酸6.02

苯丙氨酸5.48

絲氨酸5.68

蘇氨酸6.16

酪氨酸5.66

半胱氨酸5.05

蛋氨酸5.74

脯氨酸6.30

色氨酸5.89

賴氨酸9.74

精氨酸10.76

組氨酸7.59

天冬氨酸2.77

谷氨酸3.22

天冬酰胺5.41

谷氨酰胺5.65

出自《有機(jī)化學(xué)》（高等教育出版社 2004.11，曾昭瓊主編）

isoeletric point ，pI 定義：

2、氨基酸凈電荷為零時的pH值。

3、氨基酸是兩性電解質(zhì)，在堿性溶液中表現(xiàn)出帶負(fù)電荷，在酸性溶液中表現(xiàn)出帶正電荷，在某一定pH溶液中，氨基酸所帶的正電荷和負(fù)電荷相等時的pH,稱為該氨基酸的等電點。

氨基酸等電點常見問題

1、氨基酸的甲醛滴定（formal titration）

氨基酸等電點原理

氨基酸雖然是一種兩性電解質(zhì)，即是酸性又是堿性，但它卻不能直接用酸堿滴定來進(jìn)行測量。這是因為氨基酸的酸堿滴定的等電點pH過高（12-13）或是過低（1-2）沒有適合的指示劑可備選用。而向氨基酸中加入過量的甲醛，用氫氧化鈉滴定時，由于甲醛可與氨基酸上的—N H3結(jié)合，形成—NH—CH2OH、—N(CH2—OH)2等羥甲基衍生物，而降低了氨基酸的堿性，相對增強(qiáng)了—N H3的解離，使滴定終點移到了pH9附近，在酚酞指示劑的變色區(qū)域內(nèi)，能夠用酚酞作為指示劑進(jìn)行滴定。

以上出自《生物化學(xué)》（高等教育出版社 2006.5，王鏡巖等主編）

氨基酸等電點流程

甲醛滴定法測定氨基酸含量

目的

初步掌握甲醛滴定法測定氨基酸含量的原理和操作要點

原理

水溶液中的氨基酸為兼性離子，因而不能直接用堿滴定氨基酸的羧基。甲醛可與氨基酸上的—N H3結(jié)合，形成—NH—CH2OH、—N(CH2—OH)2 等羥甲基衍生物，使N H3上的H 游離出來，這樣就可以用堿滴定N H3放出H ，測出氨基氮，從而計算氨基酸的含量。

若樣品中只含有單一的已知氨基酸，則可由此法滴定的結(jié)果算出氨基酸的含量。若樣品中含有多種氨基酸（如蛋白質(zhì)水解液），測不能由此法算出氨基酸的含量。

脯氨酸與甲醛作用后，生成的化合物不穩(wěn)定，導(dǎo)致滴定后結(jié)果偏低；酪氨酸含酚基結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致滴定結(jié)果偏高。

材料、試劑與器具

（一）試劑

1、0.5%酚酞酒精溶液

稱0.5g酚酞溶于100ml60%酒精中。

2、0.05%溴麝香草酚藍(lán)溶液

取0.05溴麝行草酚藍(lán)溶于100ml 20%乙醇溶液中。

3、1%甘氨酸溶液

取1g甘氨酸溶于100ml蒸餾水。

4、標(biāo)準(zhǔn)0.100mol/L 氫氧化鈉溶液

5、中性甲本醛溶液

取甲醛溶液50ml，加0.5%酚酞指示劑約3ml，滴加0.1mol/LnaOH溶液，使溶液呈微粉紅色，臨用前中和。

（二）實驗器具

1、錐形瓶 2、堿式滴定管

3、 移液管洗耳球 4、天平

5、容量瓶 6、試劑瓶

7、量筒 8、玻棒與燒杯

氨基酸等電點操作步驟

1、取3只100ml錐形瓶，按下表加入試劑

錐形瓶編號

試劑

樣品1

樣品2

空白

1%甘氨酸溶液或樣品（ml）

2.0

2.0

—

蒸餾水（ml）

5.0

5.0

7.0

中性甲醛溶液（ml）

5.0

5.0

5.0

0.05%溴麝香草酚藍(lán)溶液（滴）

2

2

2

0.5%酚酞乙醇溶液（滴）

4

4

4

2、混勻后用標(biāo)準(zhǔn)0.100mol/L氫氧化鈉溶液滴定至紫色（pH8.7~9.0）

3、結(jié)果計算

每毫升氨基酸溶液中含氨基氮的毫克數(shù)為

式中：V1為滴定樣品消耗氫氧化鈉的體積（ml）；

V2為滴空白消耗氫氧化鈉的體積（ml）；

1.4008 為1ml 0.1mol/L氫氧化溶液相當(dāng)?shù)牡浚╩g）

氨基酸等電點注意事項

利用甲醛滴淀法可以用來測定蛋白質(zhì)的水解程度。隨著蛋白質(zhì)水解度的增加，滴定值也增加，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)水解完成后，滴定值不再增加。

氨基酸等電點文獻(xiàn)

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紙層析法分離鑒定氨基酸.

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