自從1946年瑞典物理化學家Tiselius教授研制的第一臺商品化移界電泳系統(tǒng)問世以來,電泳分析儀發(fā)展極其迅速。特別是隨著支持介質的更新,各種各樣的電泳分析裝置相繼推出,以適應不同國家實驗室進行教學、臨床和科研工作的需要。20世紀70年代以來,已有越來越多的自動化電泳分析儀相繼被引入臨床實驗室,并在各種疾病的臨床診治中發(fā)揮著越來越重要的作用 。
1. 早期階段(~1970年以前)
支持介質有醋酸纖維素薄膜(簡稱醋纖膜)及瓊脂糖凝膠兩大類,這一時期的電泳分析儀多用于蛋白質如血清蛋白、脂蛋白、血紅蛋白等項目分析。
2. 中期階段(1970年~1990年)
這一時期電泳分析儀主要是可見光/熒光雙系統(tǒng)自動電泳掃描儀,熒光試劑與熒光掃描儀的推出,在臨床上極大地方便了乳酸脫氫酶(LD)和肌酸激酶(CK)同工酶的測定。
3. 發(fā)展階段(1990年~至今)
這一時期電泳分析儀以自動化為最大變化特點。常見有全自動熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀、全自動醋纖膜電泳儀、全自動瓊脂糖電泳儀等幾類 。
1. 首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯(lián)接,注意極性不要接反。
2. 電泳儀電源開關調至關的位置,電壓旋鈕轉到最小,根據(jù)工作需要選擇穩(wěn)壓穩(wěn)流方式及電壓電流范圍。
3. 接通電源,緩緩旋轉電壓調節(jié)鈕直到達到的所需電壓為止,設定電泳終止時間,此時電泳即開始進行。
4. 工作完畢后,應將各旋鈕、開關旋至零位或關閉狀態(tài),并撥出電泳插頭。
電泳儀是實現(xiàn)電泳分析的儀器。電泳是一種帶電分子在電場中向著電性相反的電極移動的現(xiàn)象。利用電泳現(xiàn)象進行物質分離的技術,稱電泳技術 。
電壓電流和功率三者確定兩個另一個就可以確定了,所以兩種只是對溫度的要求不同。 實際上,三恒電源主要是跑大板的PAGE膠用的,有溫度感應器。
這個得看你是是國產(chǎn)還是進口的吧,一般進口的得40萬左右
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區(qū)帶電泳則需用各種類型的物質作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學領域中最常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據(jù)這一特征,應用電泳法便可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組份分析或單個組份提取制備,這在臨床檢驗或實驗研究中具有極其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設計制造的。
1.電泳儀通電進入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2.儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內部附設有保險絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導致儀器損壞。
3.由于不同介質支持物的電阻值不同,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
4.在總電流不超過儀器額定電流時(最大電流范圍),可以多槽關聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5.某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機,但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負載再開機,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機器損壞。
6.使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進行檢修,以免發(fā)生意外事故。
研發(fā)背景
1937年,瑞典生化學家Tiselius集前人百余年探索電泳現(xiàn)象之大成,發(fā)明了Tiselius電泳儀,在此基礎上建立了研究蛋白質的自由界面電泳方法,利用該法首次證明人血清是由白蛋白(A)、α、β、γ球蛋白組成,并因此于1948年獲得阿果獎。隨后電泳技術的發(fā)展突飛猛進,1949年,RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質經(jīng)電泳分離可依次分為白蛋白,α1、α2、β、γ球蛋白五個組分,1957年Reiner對人血清五個組分蛋白進行了定量分析。
但自由界面電泳沒有固定支持介質,擴散和對流作用較強,影響分離效果,于是在50年代相繼出現(xiàn)了固相支持介質電泳。最初的支持介質是濾紙和醋酸纖維素膜,目前這些介質在實驗室已經(jīng)應用較少。在很長一段時間里,小分子物質如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質進行電泳分離、分析,但目前一般使用靈敏度更高的技術如高效液相色譜法(HPLC)等來進行分析。而對于復雜的生物大分子,以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質進行電泳,其分離效果并不理想。于是1959年,Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝膠作支持介質建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳,從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果,增強了電泳技術的發(fā)展、滲透及與其他技術結合配套的能力。致使各式各樣的電泳技術和電泳材料如雨后春筍、競相爭榮,成為當代實驗科學技術中品種繁多、應用廣泛、基礎與尖端技術皆備的大技術。
根據(jù)電泳中是否使用支持介質分為自由電泳和區(qū)帶電泳。
自由電泳不使用支持介質,電泳在溶液中進行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳指懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細胞)通電后全部移動,不出現(xiàn)界面,如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質集中在某一層,形成各自的界面而進行定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴精密的電流儀器,僅在少數(shù)特殊電泳如等電聚焦電泳和等速電泳中使用。
區(qū)帶電泳都使用支持介質,根據(jù)支持介質不同分為濾紙電泳、醋纖膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳等。此外,根據(jù)支持介質的裝置形式不同又可分為水平板式電泳、垂直板式電泳、垂直盤狀電泳、毛細管電脈、橋形電泳和連續(xù)流動電泳等。
在溶液中能吸附帶電質點或本身帶有可解離基團的物質顆粒,如蛋白質、氨基酸等,在一定的pH值條件下,于直流電場中必然會受到電性相反的電極吸引而發(fā)生移動。不同物質的顆粒在電場中的移動速度除與其帶電狀態(tài)和電場強度有關外,還與顆粒的大小、形狀和介質黏度有關。根據(jù)這一特征,應用電泳法便可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備,電泳儀正是基于上述原理設計制造的。
電泳的影響因素很多,主要有被分離物質的帶電荷量多少、電場強度、緩沖液的pH值和離子強度及支持介質的化學惰性 。
常用電泳設備的基本結構包括:電源、電泳槽及附加裝置,如圖1、2所示。
根據(jù)電泳中是否使用支持介質分為自由電泳和區(qū)帶電泳。
自由電泳不使用支持介質,電泳在溶液中進行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳指懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細胞)通電后全部移動,不出現(xiàn)界面,如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質集中在某一層,形成各自的界面而進行定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴精密的電流儀器,僅在少數(shù)特殊電泳如等電聚焦電泳和等速電泳中使用。
區(qū)帶電泳都使用支持介質,根據(jù)支持介質不同分為濾紙電泳、醋纖膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳等。此外,根據(jù)支持介質的裝置形式不同又可分為水平板式電泳、垂直板式電泳、垂直盤狀電泳、毛細管電脈、橋形電泳和連續(xù)流動電泳等。
常見的幾種電泳儀有:
1. 全自動熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀
具有熒光/可見光雙系統(tǒng),使用熒光試劑項目如CK、LD同工酶。優(yōu)點靈敏度、準確度高且采用高壓、低溫系統(tǒng),速度非???。
2. 全自動醋纖膜電泳儀
為可見光單系統(tǒng),使用醋纖膜電泳片,優(yōu)點為自動化程度更高。多用于臨床常規(guī)血清蛋白電泳分析。
3. 全自動瓊脂糖電泳儀
為可見光單系統(tǒng),使用瓊脂糖凝膠電泳膠片,優(yōu)點為靈敏度高,可用于低濃度蛋白檢驗,如尿蛋白及腦脊液蛋白,同工酶的分離效果也相當不錯,所能做項目較多且靈敏度較高。
4. 全自動電泳分析系統(tǒng)
該電泳儀集中了上述儀器的優(yōu)點,自動點樣、電泳、呈色(或染色、脫色)、烘干??捎酶鞣N電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可見光及熒光呈色雙系統(tǒng),是一種較理想的電泳儀。
對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備,應用于臨床醫(yī)學的實驗室檢驗或科研實驗研究。
1. 電泳儀通電進入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2. 儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內部附設有保險絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導致儀器損壞。
3. 由于不同介質支持物的電阻值不同,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
4. 在總電流不超過儀器額定電流時(最大電流范圍),可以多槽關聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5. 某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機,但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負載再開機,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機器損壞。
6. 使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進行檢修,以免發(fā)生意外事故。
1. 電泳儀的輸出達不到設定值
電泳儀的輸出值狀態(tài)遵循“歐姆定律”:電壓U=電流I×(電泳槽)電阻R
電阻R相對不變的情況下,U、I、P(功率P=電流I×電壓U)中任意1個參數(shù)恒定,其他參數(shù)也隨之恒定;而任意1個參數(shù)變化,其他參數(shù)也隨之正比變化。
如果電泳儀的輸出電壓U達不到預置值,應首先觀察I或P是否已經(jīng)恒定,或者已經(jīng)達到電泳儀所規(guī)定的最大I或P(JY電泳儀均有明確指示燈標志)。如果尚未達到極限值,將已經(jīng)恒定I或P的設置調大(有必要的話至極限值),才能夠提高電壓輸出。
如果電泳儀的電流I達不到預置值,可調整電壓U或功率P。如果電泳儀的功率P達不到預置值,可調整電壓U或電流I。
2. 電腦控制電泳儀過壓報警
1)檢查是否空載使用。
2)是否電泳槽未加緩沖液。
3)是否電泳槽鉑金絲斷。
3. 過流保護
1)是否存在電泳槽短路現(xiàn)象。
2)緩沖液是否選錯。
4. 漏電保護
1)是否有液體濺入儀器內部或輸出接口上。
2)是否有很多灰塵落入儀器內部。
[1]許偉華,劉冬霞,龍輝,等.全自動毛細管電泳儀在異常血紅蛋白篩查中的應用[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2018,36(02):178-181.
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[3]高貴,韓四平,王智,等.P/ACE MDQ毛細管電泳儀的正確使用與維護[J].現(xiàn)代科學儀器,2002(06):62-64.
穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀是提供電泳的專用電源設備,作電泳時應配合所需不同型號的電泳槽共同工作。一般只可用于電泳場合,對用于其它場合時應極其小心。
另外穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀不可與其它帶電設備串并聯(lián)使用。該產(chǎn)品按醫(yī)用電氣設備安全分類屬I類B型普通設備。
適用范圍
穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀是應用電泳技術時使用的儀器。
在醫(yī)院臨床化驗中,在公安、政法工作檢測中,在大專院校試驗室中進行電泳時使用該儀器.
電腦三恒多用電泳儀-DYY-12;電腦三恒多用電泳儀-DYY-11;電腦三恒多用電泳儀-DYY-12C;半干式碳板轉印電泳儀(槽);DNA回收電泳儀(槽)DYCP-43B型等。
按支持物的物理性狀不同,電泳可分為
(1)濾紙為支持物的紙電泳
(2)粉末電泳: 如纖維素粉,淀粉,玻璃粉電泳
(3)凝膠電泳:如瓊脂,瓊脂糖,硅膠,淀粉膠,聚丙烯酰胺凝膠電泳
(4)緣線電泳:如尼龍絲,人造絲電泳
產(chǎn)品名稱(中文)全自動電泳儀
產(chǎn)品名稱(英文)Microtech 696PC
注冊號國藥管械(進)字2002第3400407號
產(chǎn)品性能結構及組成主機(電泳槽、樣品板、加樣頭、機械臂、干燥臂、掃描器、控制部件、內置UPS等)、計算機、打印機(選件)等部件組成。其中,主機中的醋酸纖維膜規(guī)格為60mm×76mm、自動掃描頭8個、樣品速度為80個/小時、樣品數(shù)(微量/半微量)96/24個。
產(chǎn)品適用范圍供臨床單位用于血清蛋白、脂蛋白、血紅蛋白、尿蛋白的分離和分析。
注冊代理北京市斑珀斯技貿有限責任公司
售后服務機構北京市斑珀斯技貿有限責任公司
批準日期2002.04.25
有效期截止日2006.04.24
生產(chǎn)廠商名稱(英文)Interlab S.R.L.Italy
生產(chǎn)廠地址(中文)Via Rina Monti,26 00155 Rome Italy
生產(chǎn)場所生產(chǎn)國(中文)意大利
規(guī)格型號696 PC
產(chǎn)品標準進口產(chǎn)品
注冊標準 INTERLAB RS-001-2001《MICROTECH系列全自動電泳儀》 2100433B