吸附層析法是運用較多的一種層析方法,特別適用于很多中等分子量的樣品(分子量小于1,000的低揮發(fā)性樣品)的分離,尤其是脂溶性成分一一般不適用于高分子量樣品如蛋白質(zhì)、多糖或離子型親水住化合物等的分離。吸附層析的分離效果,決定于吸附劑、溶劑和被分離化合物的性質(zhì)這三個因素。
中文名稱 | 吸附層析法 | 常用方法 | 液一固吸附層析 |
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吸附劑 | 硅膠、氧化鋁、活性炭、硅酸鎂等 |
柱層析法定義:柱層析技術(shù)又稱柱色譜技術(shù)。在圓柱管中先填充不溶性基質(zhì),形成一個固定相。將樣品加到柱子上,用特殊溶劑洗脫,溶劑組成流動相。在樣品從柱子上洗脫下來的過程中,根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流...
以中壓柱層析法提取分離冬凌草甲素為例 以一定比例的石油醚一為洗脫液,60ML/MIN的流速進行梯度洗脫,柱的使用壓力為2~ 3KG/C 。按每份500ML收集,TLC檢識展開劑一氯仿(2:8),顯色劑...
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氣體吸附 (氮氣吸附法 )比表面積測定 比表面積分析測試方法有多種,其中氣體吸附法因其測試原理的科學(xué)性,測試過程的可靠性,測試結(jié) 果的一致性,在國內(nèi)外各行各業(yè)中被廣泛采用,并逐漸取代了其它比表面積測試方法,成為公認(rèn)的最權(quán)威 測試方法。 許多國際標(biāo)準(zhǔn)組織都已將氣體吸附法列為比表面積測試標(biāo)準(zhǔn), 如美國 ASTM 的 D3037,國際 ISO 標(biāo)準(zhǔn)組織的 ISO-9277 。我國比表面積測試有許多行業(yè)標(biāo)準(zhǔn), 其中最具代表性的是國標(biāo) GB/T19587-2004 《氣 體吸附 BET 法測定固體物質(zhì)比表面積》。 氣體吸附法測定比表面積原理, 是依據(jù)氣體在固體表面的吸附特性, 在一定 的壓力下,被測樣品顆粒(吸附劑)表面在超低溫下對氣體分子(吸附質(zhì)) 具有可逆物理吸附作用, 并對應(yīng)一定壓力存在確定的平衡吸附量。 通過測定 出該平衡吸附量, 利用理論模型來等效求出被測樣品的比表面積。 由于實際 顆粒外
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評分: 4.4
氨基酸的分離(紙層析法) 一、實驗原理 1、層析法又稱色譜法,是一種物理的分離方法。利用混合物中各組分 物理化學(xué)性質(zhì)的差異(如吸附力、分子形狀及大小、分子親和力、分 配系數(shù)等),使各組分以不同程度分布在固定相和流動相兩相中,并 使各組分以不同速度移動,從而得到有效的分離。 操作方式:紙層析、薄層層析、柱層析等 分離機理:分配層析、吸附層析、離子交換層析、凝膠層析、親和層 析等 2、紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法,展層溶劑由有機 溶劑和水組成。濾紙纖維上的羥基具有親水性,在濾紙上水就被吸附 在纖維素的纖維之間形成固定相。當(dāng)有機溶劑(流動相)沿紙流動經(jīng) 過層析點時,層析法上溶質(zhì)就在水相和有機相之間不斷進行分配。由 于溶質(zhì)就在水相和有機相之間不斷進行分配。由于溶質(zhì)中各組分的分 配系數(shù)不同,移動速率也不同,因而可以彼此分開。 物質(zhì)被分離后在濾紙上的移動速率用 值表示: 只要條件(如溫度
其原理是利用吸附劑對混合試樣各組分的吸附力不同而使各組分分離。當(dāng)采用溶劑洗脫時,發(fā)生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的過程,吸附力較強的組分,移動的距離小,后出柱;吸附力較弱的組分,移動的距離大,先出柱。
薄層層析用的吸附劑與其選擇原則和柱層析相同。主要區(qū)別在于薄層層析要求吸附劑(支持劑)的粒度更細(xì),一般應(yīng)小于250目,并要求粒度均勻。用于薄層層析的吸附劑或預(yù)制薄層一般活度不宜過高,以Ⅱ~Ⅲ級為宜。而展開距離則隨薄層的粒度粗細(xì)而定,薄層粒度越細(xì),展開距離相應(yīng)縮短,一般不超過10厘米,否則可引起色譜擴散影響分離效果。
紙層析法應(yīng)用
在環(huán)境分析測試中,有時用紙層析法分離試樣組分,它用于一些精度不高的分析,如3,4-苯并芘。但不如GC、HPLC應(yīng)用普遍。在做葉綠體色素分離時用到,將葉片碾碎,浸出綠色液體,將液體與層析液(石油醚)混合,將濾紙一段進入混合液體,四種色素在層析液中的溶解度不同,在濾紙上留下4條色素帶。由此觀查出各種色素的相對含量和種類。
紙層析法一般用于葉綠體中色素的分離,葉綠體中色素主要包括胡蘿卜素、葉黃素、 葉綠素a、葉綠素b,它們在層析液中的溶解度不同,溶解度大的隨層析液在濾
紙上擴散地快,反之則慢;含量較多者色素帶也較寬。最后在濾紙上留下4條色素帶,所以利用紙層析法
能清楚地將葉綠體中的色素分離。
紙層析法中所用的有機溶劑如丙酮等,一般有揮發(fā)性、并有一定毒性,使用時要注意密封層析,避免吸入過多有害揮發(fā)物。