大青葉中靛玉紅HPLC測定方法建立

曼地亞紅豆干杉枝葉粗提液采用正己烷萃取,碳酸鉀水溶液堿洗兩步除雜處理后,再用hplc測定分析紫杉醇含量。采用外標(biāo)峰面積法進(jìn)行定量分析。經(jīng)分析曼地亞紅豆干杉枝葉中紫杉醇含量為0.012%,rsd為1.46%。

目的:建立測定橘紅枇杷顆粒中柚皮苷含量的方法。方法:采用高效液相色譜法。色譜柱為nucltosilc18(250mm×4.6mm,10μm),流動相為甲醇-冰醋酸-水(35∶4∶60),檢測波長為283nm,流速為1.0ml·min-1。結(jié)果:柚皮苷進(jìn)樣量在0.6～1.4μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好線性關(guān)系(r=0.9998);平均回收率為97.36%,rsd=1.37%(n=6)。結(jié)論:本方法簡便、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好,可用于測定橘紅枇杷顆粒中柚皮苷的含量。

[目的]優(yōu)化大青葉多糖的提取工藝。[方法]以山東大青葉為材料,采用復(fù)合酶(纖維素酶、果膠酶、胰蛋白酶)水解、乙醇沉淀法提取其中的多糖,并通過正交試驗確定復(fù)合酶的最佳配比及浸提溫度、浸提時間、ph值等對多糖得率的影響。[結(jié)果]復(fù)合酶的最佳配比為:纖維素酶1.5%,果膠酶2.0%,胰蛋白酶1.5%;最佳反應(yīng)條件為溫度40℃,ph值5,時間90min,此條件下大青葉多糖的平均得率為18.24%。[結(jié)論]該研究確定了復(fù)合酶法提取大青葉多糖的最佳工藝。

目的:建立測定麥冬中沿階草酮甲的高效液相色譜法。方法:色譜柱:hypersilc18柱(150mm×4.6mm,5μm);流動相:甲醇-水(75∶25);流速1.0ml/min;檢測波長298nm。結(jié)果:沿階草酮甲進(jìn)樣量在0.918～5.508μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好,回歸方程y=3645282x-420010(r=0.99976),平均回收率為99.80%,rsd=1.74%(n=6)。結(jié)論:所建立的高效液相色譜法簡便、快速、重復(fù)性好,可用于麥冬中沿階草酮甲的質(zhì)量控制。

目的建立倒卵葉五加中紫丁香苷含量測定方法。方法采用rp-hplc法,c18柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水(8∶92)為流動相,檢測波長為265nm。結(jié)果方法線性關(guān)系良好,r=0.9999,加樣平均回收率為97.3%,rsd為1.5%。結(jié)論方法操作簡便,準(zhǔn)確可靠,可用于該藥材質(zhì)量控制。

目的:建立面條樹中鴨腳樹葉堿的hplc含量測定法。方法:色譜柱為thermogoldc18(250mm×4.60mm,5μm),檢測波長為287nm,流動相為甲醇-水-三乙胺(47∶53∶0.005,v/v),流速為1.0ml.min-1,柱溫為35℃。結(jié)果:鴨腳樹葉堿在0.14～14.00μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,r=0.9999;平均回收率為96.98%,rsd=0.9%(n=9)。結(jié)論:該法簡便、準(zhǔn)確,可用于面條樹的質(zhì)量控制研究。

目的:建立細(xì)葉杜香中熊果酸的含量測定方法。方法:采用高效液相色譜法,色譜柱:agilentc_(18)(4mm×150mm,5μm);流動相:乙腈:0.05%磷酸(70:30);流速:1.0ml/min;柱溫:25℃;檢測波長:220nm。結(jié)果:熊果酸在0.0375～0.1375mg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率為99.78%,rsd=1.247%(n=6)。結(jié)論:該方法簡便可行、重復(fù)性好,可作為細(xì)葉杜香質(zhì)量評價的依據(jù)。

為了建立測定細(xì)葉杜香葉中秦皮乙素、秦皮素、金絲桃苷和槲皮素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的方法,采用反相高效液相色譜法(色譜條件:色譜柱為inertsilods-sp(5μm4,.6mm×250mm,柱號:9ki92609)、流動相為v(甲醇)∶v(0.2%醋酸)=43∶57、流速1.0ml.min-1、檢測波長350nm),測得秦皮乙素、秦皮素、金絲桃苷和槲皮素4種成分的平均加樣回收率分別為99.71%9、8.62%1、00.13%9、8.33%,其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差rsd分別為1.45%1、.53%、1.04%1、.69%。結(jié)果表明:反相高效液相色譜法操作簡便、準(zhǔn)確,具有良好的重復(fù)性,可用于細(xì)葉杜香中此4種成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測定。

目的建立小葉榕葉中異牡荊苷的含量測定方法,并比較不同采收期小葉榕葉的異牡荊苷的含量差異。方法用hplc法進(jìn)行測定,流動相為甲醇-水(38∶62),檢測波長為270nm。結(jié)果不同采收期藥材異牡荊苷最高含量達(dá)0.69%,最低為0.18%,7~12月份含量明顯高于其他月份。結(jié)論該方法簡便,準(zhǔn)確,重復(fù)性好,適于小葉榕葉中異牡荊苷的含量測定。

目的:建立沙苑子中3個黃酮的hplc的含量測定方法。方法:采用高效液相色譜法,kromasilc18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm),流動相為甲醇-1%冰醋酸(56∶44),流速為1ml.min-1,柱溫30℃,檢測波長為266nm。結(jié)果:沙苑子中毛蕊異黃酮、芒柄花素、鼠李檸檬素的線性范圍依次為0.348～1.74(r=0.9997),0.288～1.44(r=0.9998),0.120～0.60(r=0.9997),平均回收率(n=5)分別為100.3%(rsd0.33%),99.8%(rsd2.78%),98.6%(rsd2.91%)。結(jié)論:該方法操作簡便,結(jié)果準(zhǔn)確,能夠同時測定沙苑子藥材中3個黃酮的含量,為沙苑子的質(zhì)量控制和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供了參考依據(jù)。

目的:測定毛果杜鵑中槲皮苷的含量。方法:采用hplc,用hypersilc_(18)色譜柱,以乙腈-0.05%磷酸(20:80)為流動相,檢測波長350nm。結(jié)果:槲皮苷在1.966～98.3μg·ml~(-1)線性關(guān)系良好,槲皮苷平均回收率為100.30%,rsd為2.54%(n=6)結(jié)論:該方法簡便快速,準(zhǔn)確實用,可用于控制毛果杜鵑的質(zhì)量。

目的:建立hplc法測定紅花微乳中羥基紅花黃色素a的含量。方法:采用色譜柱:diamonsilc18(2)5μm,250mm×4.6mm;流動相:甲醇-0.4%的磷酸水溶液(三乙胺調(diào)至ph=3.3)為30∶70;檢測波長:402nm;柱溫:室溫。結(jié)果:羥基紅花黃色素a在0.3128～3.128μg的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r=0.9990)。結(jié)論:本測定方法快捷,簡便,準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好。

目的建立hplc法測定復(fù)方紅根草片中蒙花苷含量。方法采用diamonsilc18色譜柱,以乙腈-水(23:77)為流動相,檢測波長334nm。結(jié)果蒙花苷在0.059～0.295μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,r=0.9994,平均回收率為98.2%(n=6),rsd為1.4%。結(jié)論本法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于復(fù)方紅根草片中蒙花苷含量測定。

建立測定水解后的甘青鐵線蓮中齊墩果酸含量的方法,并比較地上部分與根中齊墩果酸的含量。采用hplc法。fusion-rpc18色譜柱(4.60mm×250mm,4μm);流動相為甲醇-0.2%h3po4(89∶11);檢測波長210nm;流速1.0ml/min;柱溫30℃。齊墩果酸色譜峰分離度良好,在5.30～1.06μg范圍內(nèi)成良好的線性關(guān)系,r=0.9999,平均回收率為97.8%,rsd=1.0%(n=5)。根中齊墩果酸的含量低于地上部分。方法可作為齊墩果酸的定量分析方法。

目的:建立測定四季青片中山奈素含量的方法。方法:采用hplc法,capcellpakc18(4.6mm×250mm,5μm)色譜柱,流動相為甲醇-0.1%磷酸溶液(65∶35),流速1.0ml·min-1,檢測波長為366nm。結(jié)果:山奈素在0～0.3752μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,r=0.9999(n=8);平均回收率為98.48%,rsd為2.66%(n=6)。結(jié)論:方法準(zhǔn)確、操作簡便,重復(fù)性好,可用于四季青片的質(zhì)量控制。

運(yùn)用高效液相色譜法(hplc)建立一種測定白蘭地中鞣花酸含量的方法,該方法簡單快速,準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性好。通過測定發(fā)現(xiàn),不同品質(zhì)的白蘭地中鞣花酸含量不同。該研究也為進(jìn)口白蘭地的品質(zhì)和酒齡鑒定提供一種可行的方法。

目的建立hplc法測定雙黃連顆粒中連翹苷含量的方法。方法采用agilentextend-c18色譜柱,以乙腈-水(25∶75)為流動相,流速為0.8ml.min-1,檢測波長為278nm,柱溫為25℃。結(jié)果連翹苷在0.21432～3.2148μg范圍內(nèi)峰面積與進(jìn)樣量線性關(guān)系良好(r=1.0000),平均回收率為95.7%,rsd為0.9%。結(jié)論所建立的方法簡便、準(zhǔn)確,可用于雙黃連顆粒的質(zhì)量控制。

以hplc法作為大青葉中靛玉紅含量的檢測方法，探討了不同ph值和不同萃取溶劑對靛玉紅提取的影響，確立了大青葉中靛玉紅含量的測定方法。結(jié)果表明：在試驗條件下，靛玉紅在1．5～24μg／ml范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0．9999），精密度rsd=0．64％，加樣回收率為97．33％，重現(xiàn)性rsd=0．54％。hplc法簡單可行，準(zhǔn)確性好，重現(xiàn)性高，是大青葉中靛玉紅含量測定的有效方法。

為了建立并優(yōu)化大青葉srap-pcr擴(kuò)增體系。以大青葉基因組dna為模板,通過正交試驗設(shè)計,從mg2+、dntp、引物、taqdna聚合酶和模板dna5種因素5個水平對大青葉srap-pcr反應(yīng)體系進(jìn)行優(yōu)化。建立的大青葉srap-pcr最佳反應(yīng)體系為25μl反應(yīng)體系中含1.5mmol·l-1mg2+、0.15mmol·l-1dntps、0.60μmol·l-1引物、2.0utaqdna聚合酶和26ngdna模板。在這一體系下對不同大青葉材料的pcr擴(kuò)增和在不同引物組合下擴(kuò)增都證明該體系穩(wěn)定可靠適合于大青葉srap分子標(biāo)記。這一體系的建立為今后利用srappcr分子標(biāo)記技術(shù)開展大青葉分子遺傳學(xué)研究奠定了基礎(chǔ)。

目的建立測定黃柏青葉口服液中小檗堿含量的方法。方法采用高效液相色譜法,色譜柱:agilentzorbaxxdb-c18(4.6mm×150mm,5μm);流動相:乙腈-0.1%磷酸溶液(55∶45,每100ml+十二烷基硫酸鈉0.2g);流速:1.0ml/min;檢測波長:345nm;進(jìn)樣量:10μl;柱溫為室溫。結(jié)果鹽酸小檗堿在2.712~135.6(g/ml(r=0.9999)范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好,平均回收率分別為100.64%,rsd為2.53%(n=6)。結(jié)論本方法快速、簡便、準(zhǔn)確,可用于黃柏青葉口服液中小檗堿的含量測定。

目的應(yīng)用hplc法,對紫果西番蓮葉中異牡荊素的含量進(jìn)行測定。方法首先采用硅膠柱色譜進(jìn)行分離純化;采用hplc,hypersilodsc18色譜柱(4.6×250mm,5μm);乙腈-0.1磷酸(18∶82)為流動相;流速1.0ml/min;進(jìn)樣量:10μl,檢測波長350nm。結(jié)果異牡荊素在0.012～0.120mg/ml范圍內(nèi)時,呈現(xiàn)良好線性關(guān)系(r2=0.997);平均回收率為98.26%,rsd1.4%;紫果西番蓮葉中異牡荊素的平均含量為0.0873%。結(jié)論該方法準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性良好,可用于西番蓮屬植物中異牡荊素含量的測定。

目的：建立反相高效液相色譜法測定大葉紫珠中毛蕊花糖苷的含量。方法：采用agilenteclipsexdb-c18色譜柱（250mm×4.6mm,5μm）,以乙腈-0.5%磷酸（18：82）為流動相,流速1.0ml.min-1,檢測波長332nm,柱溫30℃。結(jié)果：毛蕊花糖苷進(jìn)樣濃度在12.01～240.2μg.ml-1范圍內(nèi),與峰面積呈良好線性關(guān)系;平均回收率（n=6）為99.6%,rsd為1.4%。結(jié)論：該方法簡便、準(zhǔn)確,重復(fù)性好,可作為大葉紫珠的質(zhì)量控制方法。