中文名稱:乳酸脫氫酶
英文名稱:lactate dehydrogenase,LDH
定義:廣泛存在的催化乳酸和丙酮酸相互轉(zhuǎn)換的酶。L-乳酸脫氫酶(編號:EC 1.1.1.27)作用于L-乳酸;D-乳酸脫氫酶(編號:EC 1.1.1.28)作用于D-乳酸,兩者均以NAD+為氫受體。在厭氧酵解時,催化丙酮酸接受由3-磷酸甘油醛脫氫酶形成的NADH的氫,形成乳酸。
所屬學(xué)科:生物化學(xué)與分子生物學(xué)(一級學(xué)科);酶(二級學(xué)科)
乳酸脫氫酶是一種糖酵解酶。乳酸脫氫酶存在于機體所有組織細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi),其中以腎臟含量較高。乳酸脫氫酶是能催化乳酸脫氫生成丙酮酸的酶,幾乎存在于所有組織中。有兩個亞單位。同工酶有五種形式,即LDH-1(H4)、LDH-2(H3M)、LDH-3(H2M2)、LDH-4(HM3)及LDH-5(M4),可用電泳方法將其分離。LDH同功酶的分布有明顯的組織特異性,所以可以根據(jù)其組織特異性來協(xié)用診斷疾病。正常人血清中LDH2〉LDH1。如有心肌酶釋放入血則LDH1〉LDH2,利用此指標(biāo)可以觀察診斷心肌疾病。
乳酸脫氫酶(LDH)分子量為135~140KD,由兩種亞單位組成:H(表示heart)和M(表示muscle)。它們按不同的形式排列組合形成含4個亞基的5種同工酶,即:LDH1(H4)、LDH2(H3M1)、LDH3(H2M2)、LDH4(HM3)、LDH5(M4)。
LDH催化丙酮酸與乳酸之間還原與氧化反應(yīng),在堿性條件下促進(jìn)lactic acid向pyruvic acid方向的反應(yīng),而在中性條件下促進(jìn)pyruvic acid向lactic acid的轉(zhuǎn)化(為逆反應(yīng))。LDH是參與糖無氧酵解和糖異生的重要酶。
由于LDH幾乎存在于所有體細(xì)胞中,而且在人體組織中的活性普遍很高,所以血清中LDH的增高對任何單一組織或器官都是非特異的。在AMI時升高遲、達(dá)峰晚,故對早期診斷價值不大。由于半壽期長(10~163小時),多用于回顧性診斷,如對人院較晚的AMI病人、亞急性MI的診斷和病情監(jiān)測。
LDH在組織中的分布特點是心、腎以LDH1為主,LDH2次之;肺以LDH3.LDH4為主;骨骼肌以LDH5為主;肝以LDH5為主,LDH4次之。血清中LDH含量的順序是LDH2>LDH1>LDH3>LDH4>LDH5.
(1)瓊脂糖電泳法:
LDH1(28.4±5.3)%;
LDH2(41.0±5.0)%;
LDH3(19.0±4.0)%;
LDH4(6.6±3.5)%;
LDH5(4.6±3.0)%。
(2)醋酸纖維素薄膜法:
LDH1(25.32±2.62)%
LDH2(34.36±1.57)%
LDH3(21.86±1.38)%
LDH4(11.3±1.84)%
LDH5(7.97±1.59)%
(3)聚丙烯酰胺法:
LDH1(26.9±0.4)%
LDH2(36.0±0.5)%
LDH3(21.9±0.4)%
LDH4(11.1±0.4)%
LDH5(4.1±0.3)%
總之,健康成人血清LDH同工酶有如下的規(guī)律:LDH2>LDH1>LDH3>LDH4>LDH5。
乳酸脫氫酶(LDH)是催化乳酸和丙酮相互轉(zhuǎn)化的同工酶,屬于氫轉(zhuǎn)移酶。該酶存在于所有動物的組織中,在肝臟中活性最高,其次為心臟、骨骼肌、腎臟,在腫瘤組織及白血病細(xì)胞中也能檢測到。在大多數(shù)動物組織中,它是由兩種肽鏈按一定比例組成的5種四聚體。它的每條肽鏈各由一個基因編碼,經(jīng)轉(zhuǎn)錄、翻譯、修飾加工等過程,最后成為有生物學(xué)活性的物質(zhì)。不同的動物,不同的組織或器官在不同的發(fā)育階段或不同的生活周期均有其特異性的同工酶酶譜。自然界中存在L和D兩種乳酸脫氫酶。
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗D-LDH抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗D-LDH抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的D-LDH呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機
3.電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
血清中乳酸脫氫酶偏高主要有惡性腫瘤,肝炎、肝硬化等疾病引起的,乳酸脫氫酶檢查偏高常見于急性肝炎、阻塞性黃疸、心肌炎、惡性腫瘤、肝硬化、肝癌、運動肌肉營養(yǎng)不良、急性白血病及惡性貧血等病癥。臨床醫(yī)學(xué)實踐表明,80%以上患者體內(nèi)的血清乳酸脫氫酶升高是由肝臟疾病引起的,尤其是急性乙肝、肝硬化、肝癌等。因此,若患者發(fā)現(xiàn)乳酸脫氫酶在血清中的含量不再正常范圍之內(nèi),應(yīng)及時到肝病醫(yī)院進(jìn)行檢測,在醫(yī)生的指導(dǎo)下進(jìn)行有針對性的治療。
脫氫乙酸鈉是白色結(jié)晶性粉末,無色無味,直接混合在需要添加的物品中使用。脫氫乙酸鈉)是聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)和世界衛(wèi)生組織(WHO)及食品添加劑衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB2760-2007認(rèn)可的一種安全、高效、廣譜...
由于甲殼素大分子中具有穩(wěn)定的環(huán)狀結(jié)構(gòu)和大分子之間存在強的氫鍵作用,使它的溶解性能變差,不溶于水、稀酸、稀堿和一般的有機溶劑中。甲殼素在濃、鹽酸、硝酸和85%磷酸等強酸中可溶解,但與此同時會發(fā)生劇烈的降...
醋酸鈉CH3COONa脫氫醋酸鈉 (學(xué)名脫氫乙酸鈉)結(jié)構(gòu)式:C8H7NaO4·H2O 脫氫醋酸鈉是聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)和世界衛(wèi)生組織(WHO)認(rèn)可的一種安全型食品防霉、防腐保鮮劑。
層狀雙金屬氫氧化物(Layered Double Hydroxide,LDH)是水滑石(Hydrotalcite,HT)和類水滑石化合物(Hydrotalcite-Like Compounds,HTLCs)的統(tǒng)稱,由這些化合物插層組裝的一系列超分子材料稱為水滑石類插層材料(LDHs)。1842年Hochstetter首先從瑞典的片巖礦層中發(fā)現(xiàn)了天然水滑石礦;二十世紀(jì)初人們由于發(fā)現(xiàn)了LDH對氫加成反應(yīng)具有催化作用而開始對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究;1969年Allmann等人通過測定LDH單晶 結(jié)構(gòu),首次確認(rèn)了LDH的層狀結(jié)構(gòu);二十世紀(jì)九十年代以后,隨著現(xiàn)代分析技術(shù)和測試手段的廣泛應(yīng)用,人們對LDHs結(jié)構(gòu)和性能的研究不斷深化。
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評分: 4.5
本文用孔徑為1200A的多孔玻璃珠作為載體,將乳酸脫氫酶固定于其上,裝入柱內(nèi),聯(lián)結(jié)于流動體系中。測定了固定化乳酸脫氫酶的表觀米氏常數(shù)和人血清中的L-乳酸。L-乳酸的線性范圍在0。1-9mmoL/L,回收率為96-103%,變異系數(shù)<0。7%,最低檢出限為0。4nmoL,每小時可進(jìn)樣35次,酶的穩(wěn)定性良好。
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評分: 4.7
[目的]為解決我國北方冬季污水處理困難的問題提供技術(shù)支持。[方法]運用TTC法分析了pH值、溫度和時間對從低溫生物膜中分離純化鑒定得到8株耐冷菌中脫氫酶活性的影響。[結(jié)果]菌株S1、S4、S5、S7和S8在最適溫度和4℃下的最適pH值都是7.5,其他3株菌在2種溫度下的最適pH值不同,但都在7.5~8.5的范圍內(nèi)。菌株S1、S3、S4、S5和S6的最適反應(yīng)溫度為30℃,菌株S2、S7和S8的最適反應(yīng)溫度為20℃。除菌株S3外,其余菌株在4℃下的最適反應(yīng)時間比最適反應(yīng)溫度下的長。在4℃下,菌株S3、S4和S6的最適pH值和最適反應(yīng)時間分別為8.5和0.6h、7.5和12.0h、8.0和0.5h,其最高脫氫酶活性分別為7.19、6.73和7.70mg(TF)/g(SS)。[結(jié)論]菌株S3、S4和S6的脫氫酶活性較高,適合用于處理低溫污水。
工程介紹
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在車來車往的街頭飚車,在崎嶇不平的沿海山路上競速,在彎彎曲曲的地下車道踩油門狂飆……在各種充滿冒險刺激的街頭賽車情景中,究竟是一向稱王F1賽場的法拉利更勝一籌,還是被冠以賽車界“戰(zhàn)神”的尼桑GTR更占優(yōu)勢?領(lǐng)先的汽車配件全球供應(yīng)商LDH雷遁控股集團,將這些動人心弦的場景一一呈現(xiàn)。
LDH集團外聯(lián)事業(yè)部門通過場地賽、車迷交流活動,集合了俊男美女,名車豪宅和上流階層自由生活方式等眾多元素,將LDH旗下超級銥金火花塞、超級全合成機油等汽車耗損件集結(jié),點燃亞洲版《速度與激情》,各場活動都非常令年輕車迷喜愛。
年輕一代熱愛冒險,充滿激情,不斷追求極限的生活理念,正如LDH雷遁超級銥金火花塞在引擎內(nèi)的迸發(fā)燃燒。
豪華機油品牌LDH雖然并不廣受老一代車主朋友的認(rèn)知,但是九零后車主已經(jīng)逐步將其應(yīng)用在自己的豪車配置上,走著高端風(fēng)格,享受著“速度與激情”。
在場地競技領(lǐng)域,LDH超級潤滑油長久以來一直以其領(lǐng)創(chuàng)全球的潤滑油科技,為各類、各級別的場地賽車提供技術(shù)保障,并因此享譽亞洲。此前華南區(qū)日產(chǎn)車隊就曾在LDH超級潤滑油和超級火花塞的技術(shù)支持下,取得珠海、肇慶等地的賽事勝利。
在對外營銷上,許多國際競技類汽車配件品牌都會中意“賽事營銷”路線,近兩年,隨著德國LDHAG最新技術(shù)引入國內(nèi),LDH雷遁亦越來越傾向以賽場實戰(zhàn)經(jīng)驗來驗證其品質(zhì)。在遵守國內(nèi)法律法規(guī)的前提下,亞洲版《速度與激情》瞄準(zhǔn)場地競技領(lǐng)域發(fā)力,在業(yè)內(nèi),LDH雷遁超級銥金火花塞當(dāng)之無愧稱為“低調(diào)的賽事火花塞”。
湖泊富營養(yǎng)化以及隨之爆發(fā)的藍(lán)藻水華已成為當(dāng)今世界許多國家面臨的重大環(huán)境問題。生活污水也愈發(fā)嚴(yán)重,富營養(yǎng)化的主要污染指標(biāo)為氮、磷較高,因此亟待研究開發(fā)深度除磷的高選擇性磷吸附劑。楊曉晶等人詳細(xì)研究了不同層次間陰離子的ZnAl-LDH及其焙燒產(chǎn)物對磷的選擇吸附行為,這種材料的高選擇磷吸附性、高穩(wěn)定性和循環(huán)使用性表明其為一類有前景的除磷吸附劑。發(fā)現(xiàn)其對于磷的選擇性吸附是通過表面上的配體交換和絡(luò)合過程進(jìn)行的。
在國家大學(xué)生創(chuàng)新實驗計劃的支持下,我們創(chuàng)新性的將ZnAl-LDH剝離成單層納米片以大幅度提高其比表面積,同時用高分子穩(wěn)定納米片,通過靜電紡絲、甩膜等技術(shù)成形為無紡布/膜,從而獲得LHD納米片與高分子的復(fù)合材料。與其他的吸附劑相比,該吸附劑具有吸附量大,不引入副污染物,合成簡便,低溫,快速,原材料成本低等優(yōu)勢。技術(shù)特點:這種材料對磷酸根具有高的選擇性,且具有良好的穩(wěn)定性和循環(huán)使用性,同時吸附磷酸跟和磷酸根之間發(fā)生配體交換。
本項目提供了高選擇性吸附磷的高分子/LDH納米復(fù)合材料的制備方法,得到的復(fù)合材料有較高的吸附性能。我們研究了引入高分子的比例,從而優(yōu)化復(fù)合體的組成,同時優(yōu)化合成技術(shù)參數(shù),獲得性能良好的復(fù)合材料。可以通過擴大試驗使其產(chǎn)品化,并進(jìn)行材料的磷吸附性能測試,在此基礎(chǔ)上設(shè)計出工藝流程,并進(jìn)行成本收益評估,最終市場化,在實際污水處理中深度吸附磷方面發(fā)揮奇效。
隨著城市和工農(nóng)業(yè)飛速發(fā)展,水體中氮磷的污染日益嚴(yán)重,大量含氮磷的污水、廢水和含化肥的農(nóng)田徑流流入水體,造成水體富營養(yǎng)化,而磷被認(rèn)為是導(dǎo)致水體富營養(yǎng)化最主要的因素,防止水資源的富營養(yǎng)化是我們當(dāng)今亟待解決的重要環(huán)境、社會問題。本發(fā)明吸附劑對P有高的吸附量、選擇性,相對于同類產(chǎn)品合成工藝,其成本低,工藝簡單,吸附/脫附循環(huán)性好,具有很好的經(jīng)濟前景。該工藝主要用于富營養(yǎng)化程度不同湖(庫)水體的除磷。
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孫春光 學(xué)歷:天津大學(xué)電子信息工程本科、保送通信與信息系統(tǒng)碩士 。
現(xiàn)擔(dān)任全國工商聯(lián)民辦教育出資者商會EMBA教育聯(lián)盟秘書長;北京左右逢源創(chuàng)業(yè)投資有限公司合伙人;中關(guān)村眾籌聯(lián)盟發(fā)起單位之一、監(jiān)事長候選單位;磁云科技合伙人;EMBA聯(lián)盟創(chuàng)業(yè)孵化器合伙人;金剛偶巴創(chuàng)意韓餐合伙人;常州火紅基金合伙人;南京亨通偉業(yè)基金合伙人;博雅金科基金合伙人;飛??釤o人機合伙人;愛投(ITOU)高管會創(chuàng)始發(fā)起人;IT高管會創(chuàng)始發(fā)起人;陳香梅公益基金會天使榮耀基金理事。在IT行業(yè)工作多年,曾任北京智網(wǎng)能達(dá)董事總經(jīng)理,北京海創(chuàng)園投資管理有限公司副總經(jīng)理(中國留學(xué)人才發(fā)展基金會支持),香港上市公司高陽科技(00818)全資子公司技術(shù)總監(jiān),瑞博強芯(天津)科技有限公司部門經(jīng)理。
EMBA聯(lián)盟是由北京大學(xué)、清華大學(xué)、長江商學(xué)院、中歐商學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、中山大學(xué)、武漢大學(xué)、四川大學(xué)、西安交通大學(xué)、哈爾濱工業(yè)大學(xué)、香港大學(xué)、香港科技大學(xué)、臺灣大學(xué)、澳門大學(xué)、新加坡國立大學(xué)、哈佛、斯坦福、賓夕法尼亞大學(xué)等海內(nèi)外商學(xué)院EMBA企業(yè)家共同發(fā)起,目前已擁有2萬多位EMBA會員(覆蓋了全國10萬EMBA同學(xué)的五分之一),已建立20多個EMBA教育聯(lián)盟群及全國31個省市自治區(qū)EMBA區(qū)域教育聯(lián)盟群及EMBA聯(lián)盟微信公共平臺。
在2萬多會員中,北京占30%、上海占20%,廣州占15%,其他區(qū)域占35%。主要會員來自各商學(xué)院EMBA校友企業(yè)家。這些會員在各行業(yè)內(nèi)具有領(lǐng)先優(yōu)勢,會員占行業(yè)比例在20%左右,銷售額占行業(yè)在10%左右。聯(lián)盟成立以來成功舉辦了兩屆EMBA聯(lián)盟春晚、“為愛而拍光亮生命”慈善活動、嗨走中國行、中國首屆EMBA企業(yè)家仲夏音樂節(jié)、EMBA聯(lián)盟創(chuàng)投匯、2015京津冀青年創(chuàng)業(yè)路演與發(fā)展論壇等一系列活動。
【左右逢源 - 構(gòu)筑夢想】北京左右逢源創(chuàng)業(yè)投資有限公司,成立于2015年3月,是全國工商聯(lián)EMBA聯(lián)盟發(fā)起成立的以服務(wù)于會員(注冊會員2萬多名)企業(yè)為主的互聯(lián)網(wǎng)投融資服務(wù)平臺。EMBA聯(lián)盟一直致力于發(fā)展“眾創(chuàng)、眾籌、眾包、眾扶”,為大眾創(chuàng)業(yè)、萬眾創(chuàng)新服務(wù)。未來,EMBA聯(lián)盟依托于線下創(chuàng)業(yè)孵化器、線上左右逢源創(chuàng)投平臺,結(jié)合產(chǎn)業(yè)資本優(yōu)勢,加大對創(chuàng)業(yè)創(chuàng)新的支持力度。