安全柜

根據(jù)主要幾項生物安全柜國際標準的規(guī)定，安全柜可分為一級、二級和三級 三大類以滿足不同的生物研究和防疫要求。安全柜的分類級別與生物安全等級無關一級生物安全柜可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風櫥一樣，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進氣口使用HEPA過濾器。一級生物安全柜本身無風機，依賴外接通風管中的風機帶動氣流，由于不能保護柜內(nèi)產(chǎn)品，目前已較少使用。

二級生物安全柜是目前應用最為廣泛的柜型。按照NSF49的中的規(guī)定，二級生物安全柜依照入口氣流風速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個級別:A1型，A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二級生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護。

三級生物安全柜是為3-4級實驗室生物安全等級而設計的，柜體完全氣密，工作人員通過連接在柜體的手套進行操作，俗稱手套箱(Glove box)，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染，適用于高風險的生物試驗。

1.要根據(jù)國家標準和有關的規(guī)定，向所有可能使用生物安全柜的用戶解釋安全柜的使用及限制條件。應發(fā)給工作人員書面規(guī)定或安全手冊、操作手冊。特別是必須明確告訴工作人員，在出現(xiàn)濺灑、破碎、方法不當?shù)那闆r下，安全柜無法保護操作人員。 2.安全柜只有在工作正常時才能使用。

3.安全柜前臉的玻璃觀察窗不得在安全柜處于使用狀態(tài)時打開。

4.柜內(nèi)放置的儀器和材料必須保持在最低數(shù)量。靜壓箱后部的空氣循環(huán)不得受阻。將材料放入安全柜的工作區(qū)之前，應對其表面進行去污處理。

5.柜內(nèi)不得使用本生燈(一種煤氣燈)，因其產(chǎn)生的熱會干擾氣流并可能損壞過濾器?？梢允褂梦⑿碗姺贌隣t，但使用一次性滅菌環(huán)則更好。

6.柜內(nèi)所有的工作要在工作面的中部或后部進行，并能從觀察面板中看到。

7.操作手后方的活動要達到最少。

8.操作手不應將手臂來回伸進伸出柜子，以免干擾氣流。

9.前送風格柵不得被便簽、滴管或其他材料堵住，否則會干擾氣流從而可能使材料受到污染，使人員處在暴露狀態(tài)。

10.應在每次工作完成后及一天結(jié)束時，使用合適的消毒劑清潔安全柜的表面。

11.柜子的風扇在工作開始前和工作完成后要再各運行5分鐘。

從生物安全柜前臉的開口流入柜內(nèi)的氣流速度約為0.45米/秒。以這一風速，柜內(nèi)單向流的一致性易受干擾，很容易被安全柜附近人員的走動、開窗、送風配風器、門的開關所干擾。按理想的布置，應放在遠離活動及可能有干擾氣流的地方。應盡量在安全柜的后側(cè)及兩側(cè)留下30厘米的空間，便于維護作業(yè)。柜子上方則留下30~35厘米的高度，以便對排風過濾器的風速進行精確測量，并為排風過濾器的更換留下足夠空間。

生物安全柜內(nèi)的所有物品，包括設備，都應在工作完成之后進行表面去污處理并從柜內(nèi)取出，因為殘留的培養(yǎng)介質(zhì)可能會提供微生物的生長條件。安全柜的內(nèi)表面應在每次使用前與使用后進行去污處理。要用消毒劑擦拭工作臺表面及內(nèi)壁面，使用的消毒劑應能殺死柜內(nèi)可能存在的所有微生物。一天工作結(jié)束時，應進行最后表面去污處理，即對工作臺、各個側(cè)面、背面及玻璃的里面進行全面擦拭?？梢允褂闷追垡夯?0%酒精，這種對目標生物有效的消毒劑。如使用漂白粉液這種有腐蝕性的消毒劑，則要用滅菌水進行二次擦拭。建議工作柜在清潔、消毒時處在工作狀態(tài)。如果其未處在工作狀態(tài)，則應運行5分鐘，以便在安全柜關閉前將其中的氣體清除掉。

對1級和2級生物安全柜的去污，是將適量的低聚甲醛(使柜內(nèi)空氣中的低聚甲醛的最終濃度為80%)置于電熱盤或煎鍋上(從柜外控制)。另將一個放有比低聚甲醛多10%的碳酸氫的電熱盤或煎鍋也放在柜內(nèi)(在柜外控制)。這第二個容器上應帶蓋，這個蓋子可以從遠處取下來(例如系在一根線上，線可以從柜外拉動)。這樣可以使提前中和的低聚甲醛達到最小。

如果相對溫度低于70%，有熱水的開口容器。如果沒有前隔板，則要用生型塑料擋板，將其用膠帶粘在前臉，確保不會有氣體漏入房間。當盤內(nèi)的低聚甲醛已全部揮發(fā)或開關已打開1小時后，將開關關閉。將安全柜放置一整晚不得觸動。然后將第二個盤子的蓋移開并打開其開關，碳酸氫氨開始揮發(fā)。這時，關閉盤子的開關，讓安全柜開始工作，使碳酸氫氨氣循環(huán)1小時。然后可以取下前隔板(或塑料擋板)，安全柜即可使用。

選擇 生物安全柜的選擇最基本取決于生物試驗中所使用的試驗品類型:

1、如果生物試驗中只涉及微生物樣品，可以使用基本類型的生物安全柜;

2、如果生物試驗中涉及了微生物樣品和微量化學試劑(非腐蝕性)，使用裝備外排管道的安全柜是必要的。因為HEPA過濾器并不能有效過濾清除化學氣體，如果不能外排，將對實驗室內(nèi)工作人員和環(huán)境造成威脅;

3、如果生物試驗中涉及了細胞毒素類藥物，例如各類癌癥治療藥物，必須使用的細胞毒素安全柜。

PS:需要明確了解生物安全柜與通風柜/超凈工作臺的區(qū)分。通風柜和超凈工作臺不屬于生物安全柜，不可使用在涉及微生物材料的實驗或生產(chǎn)過程中。

通風柜是為在化學實驗過程中清除腐蝕性化學氣體和有毒煙霧而設計的。由于沒有裝備HEPA過濾器，通風柜不能有效清除微生物介質(zhì)。放置在通風柜內(nèi)微生物樣品會散播到柜外，污染實驗室環(huán)境。

超凈工作臺是為了保護試驗品或產(chǎn)品而設計的，通過吹過工作區(qū)域的垂直或水平層流空氣防止試驗品或產(chǎn)品受到工作區(qū)域外粉塵或細菌的污染。一旦微生物樣品放置于工作區(qū)域，層流空氣將把帶有微生物介質(zhì)的空氣吹向前臺工作人員而產(chǎn)生危險。

生物安全柜的選擇最基本取決于生物試驗中所使用的試驗品類型:

1、如果生物試驗中只涉及微生物樣品，可以使用基本類型的生物安全柜;

2、如果生物試驗中涉及了微生物樣品和微量化學試劑(非腐蝕性)，使用裝備外排管道的安全柜是必要的。因為HEPA過濾器并不能有效過濾清除化學氣體，如果不能外排，將對實驗室內(nèi)工作人員和環(huán)境造成威脅;

3、如果生物試驗中涉及了細胞毒素類藥物，例如各類癌癥治療藥物，必須使用的細胞毒素安全柜。

PS:需要明確了解生物安全柜與通風柜/超凈工作臺的區(qū)分。通風柜和超凈工作臺不屬于生物安全柜，不可使用在涉及微生物材料的實驗或生產(chǎn)過程中。