mRNA差異顯示技術(shù)(mRNA differential display PCR, mRNA DD-PCR),是由Peng Liang等人在1992年建立的篩選基因差異表達(dá)的有效方法。它是將mRNA逆轉(zhuǎn)錄技術(shù)和PCR技術(shù)相結(jié)合的一種RNA指紋圖譜技術(shù)。每一種組織細(xì)胞(包括同一組織細(xì)胞經(jīng)過不同的處理)都有其特異表達(dá)的不同于其他組織細(xì)胞的基因譜,即特異的RNA指紋圖譜。
中文名稱 | mRNA差異顯示技術(shù) | 外文名稱 | mRNA differential display PCR |
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簡稱 | mRNA DD-PCR | 建立時(shí)間 | 1992年 |
mRNA差異顯示技術(shù)實(shí)驗(yàn)流程
組織樣品總RNA的提取→去除RNA樣品中的微量DNA→設(shè)計(jì)引物序列→逆轉(zhuǎn)錄歸類反應(yīng)體系的建立→PCR選擇性擴(kuò)增→mRNA DD-PCR產(chǎn)物的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳→差異表達(dá)條帶的回收→回收條帶的再次擴(kuò)增→二次擴(kuò)增產(chǎn)物的克隆、測(cè)序和GenBank查詢→Northern Blot和 Dot Blot雜交。
mRNA DD-PCR技術(shù)是篩選和克隆差異表達(dá)基因的一種快速而行之有效的方法。
mRNA差異顯示技術(shù)原理
差異基因表達(dá)是細(xì)胞分化的基礎(chǔ)。正是這些基因在細(xì)胞中的特異表達(dá)與否,決定了生命歷程中細(xì)胞的發(fā)育和分化、細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)、細(xì)胞衰老和死亡等。mRNA DD-PCR技術(shù)正是對(duì)組織特異性表達(dá)基因進(jìn) 行分離的一種快速而行之有效的方法。不同的組織/細(xì)胞或遺傳背景相同的同一組織/細(xì)胞經(jīng)過不同的處理后,提取各自的總RNA,進(jìn)行mRNA的逆轉(zhuǎn)錄合成 cDNA。進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄時(shí)3'端引物采用oligo(dT)l2MN,其中M為A、C、G中的任何一種,N為A、C、G或T中的任何一種,所以共有12種oligo(dT)l2MN引物。其申M稱為錨定引物,起增大引物Tm值的作用。N稱為分類堿基,對(duì)逆轉(zhuǎn)錄進(jìn)行歸類。
用這12種引物分別對(duì)同一總RNA樣品進(jìn)行cDNA合成,即進(jìn)行12次不同的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),從而使逆轉(zhuǎn)錄的cDNA具有12種類型,也就是對(duì)cDNA進(jìn)行12種歸類(目前較為流行的是進(jìn)行4種歸類,即3'端引物采用oligo(dT)12M, M為A、C、G中的任何一種)。5'端引物采用20條由10個(gè)堿基組成的隨機(jī)引物。對(duì)每一類cDNA進(jìn)行隨機(jī)引物和逆轉(zhuǎn)錄引物PCR擴(kuò)增,通過對(duì)不同的組織/細(xì)胞或經(jīng)不同處理的同一組織 /細(xì)胞的同一類cDNA的PCR選擇性擴(kuò)增產(chǎn)物的凝膠電泳分析,從而反映出不同樣品的基因在時(shí)間和空間上的組織特異性表達(dá)。簡述其基本原理,就是將基因背景相同的2個(gè)或幾個(gè)細(xì)胞系或組織mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,用不同引物對(duì),進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增時(shí)加入同位素標(biāo)記的核苷酸。用測(cè)序膠電泳分離PCR產(chǎn)物,經(jīng)放射自顯影即可找到被擴(kuò)增的差異表達(dá)的基因。
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她如果選用的是不計(jì)算損耗的 是沒有影響的 鋼筋是全國通用的
主要是生產(chǎn)工藝成熟,國內(nèi)的機(jī)器都是購買的國外的二手機(jī)器,另外技術(shù)培訓(xùn)也不夠到位,造成生產(chǎn)的電熱膜質(zhì)量不達(dá)標(biāo),碳墨不均勻,又沒有研發(fā)跟進(jìn),比如內(nèi)部的粘合膠的耐高溫不達(dá)標(biāo),造成起鼓,外層材料更是有問題,又...
通常情況下,在某一細(xì)胞中或某一個(gè)關(guān)鍵的發(fā)育時(shí)間點(diǎn)上有15000種以上的基因在表達(dá)。如此眾多種類的mRNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)PCR選擇性擴(kuò)增后其類型依然眾多,很難用電泳系統(tǒng)加以快速準(zhǔn)確地分離。因而需要對(duì)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的cDNA進(jìn)行歸類處理,減輕不同PCR產(chǎn)物電泳分離的難度,提高分離的準(zhǔn)確率。該方法就具有快速、靈敏和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
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利用差異顯示法(DDRT-PCR)研究杉木的2個(gè)自然變異類型(句容0號(hào)及獨(dú)干杉)木材形成過程中基因表達(dá)差異。通過銀染后切割回收54個(gè)差異條帶,經(jīng)2次擴(kuò)增和純化、克隆轉(zhuǎn)化及反向Northern雜交驗(yàn)證后共獲得29個(gè)陽性克隆。測(cè)序后進(jìn)行比對(duì)分析,結(jié)果表明:1)Blastn比對(duì)(分值>60)有9個(gè)cDNA克隆在GeneBank中找到了相似的功能,分別與核糖體蛋白基因、信號(hào)傳導(dǎo)功能、泛素蛋白基因、抗性功能、組氨酸磷酸轉(zhuǎn)移蛋白、細(xì)胞發(fā)生功能及能量代謝相關(guān);2)Blastx比對(duì)有12個(gè)序列可進(jìn)行功能推測(cè);3)還有8個(gè)cDNA在數(shù)據(jù)庫中未發(fā)現(xiàn)匹配信息。這些信息可為杉木木材形成相關(guān)基因的分離和克隆提供研究基礎(chǔ)。
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中外建筑差異賞析 論文 年級(jí): 學(xué)號(hào): 姓名: 專業(yè): 二零一四年十二月 摘 要:本文通過鑒賞分析中外代表性 古建筑 美術(shù)作品,了解不同國家、不同時(shí)期建筑美術(shù)所呈現(xiàn)出 各自不同的特點(diǎn), 進(jìn)一步加深建筑與 美術(shù)之間關(guān)系的認(rèn)識(shí), 保護(hù)、維修好這些與建筑成為一體的美術(shù)作品, 使建筑和美術(shù)作品能夠完美地結(jié)合在一起,為我們今天的社會(huì)留下珍貴的文物建筑資料。 關(guān)鍵詞: 建筑美術(shù)建筑文化建筑 建筑是人類社會(huì)文明進(jìn)步的產(chǎn)物。 早在原始社會(huì), 人們就在為尋找、 建造能夠遮風(fēng)避雨 的生存空間――建筑而辛勞。當(dāng)人們擁有了這種最基本的生存空間后, 合理、舒適、美觀的 目標(biāo)要求也就自然而然地被提了出來, 并且圍繞該目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)而在一直進(jìn)行不懈的努力, 這 種努力也使得建筑學(xué)學(xué)科本身得到了較大的發(fā)展。 目前,人們對(duì)建筑的理解早已突破了實(shí)用 性的概念, 建筑的藝術(shù)性和文化性已被越來越多的人們所接受。 建筑具有物質(zhì)和精神雙
近年來顯示技術(shù)發(fā)展很快,平板顯示器以其完全不同的顯示和制造技術(shù)使之同傳統(tǒng)的視頻圖像顯示器有很大的差別。傳統(tǒng)的視頻圖像顯示器主要為陰極射線管CRT(Cathode ray tubes);而平板顯示器與之的主要區(qū)別在于重量和體積(厚度) 方面的變化,通常平板顯示器的厚度不超過10cm (4in) ,當(dāng)然還有其他的不同,如顯示原理、制造材料、工藝以及視頻圖像顯示驅(qū)動(dòng)方面的各項(xiàng)技術(shù)等。
平板顯示器具有完全平面化、輕、薄、省電等特點(diǎn),符合未來圖像顯示器發(fā)展的必然趨勢(shì)。目前主要的平板顯示器包括: PDP (Plasma display panel)、LCD( Liquid crystal displays) 、FED( Field emission displays)、 OLED ( Organic light-emittingdiode displays )以及投影顯示技術(shù)(CRT、LCD、LCOS、DLP)等。
EPD是一種電泳顯示技術(shù)。
特點(diǎn)
又稱電泳顯示器,是類紙式顯示器較早發(fā)展的顯示技術(shù),是利用有顏色的帶電球,藉由外加電場,在液態(tài)環(huán)境中移動(dòng),呈現(xiàn)不同顏色的顯示效果,其代表廠商包括E-Ink與Sipix。日本Bridgestone所推出的高速響應(yīng)液態(tài)顯示器(QR-LPD),其工作原理與EPD相似,只是其成像的物質(zhì)不是使用帶電球,而是由黑白2色的粉末在電場之間移動(dòng)產(chǎn)生顯示效果。另外發(fā)展較早的膽固醇液晶(ChLC),是一種結(jié)構(gòu)相似于膽固醇分子的液晶。膽固醇反射式顯示器在不加電壓時(shí),可存在兩種穩(wěn)定的狀態(tài),利用兩個(gè)狀態(tài)之間的轉(zhuǎn)換,呈現(xiàn)亮暗態(tài)的顯示效果。其它還有強(qiáng)誘電性液晶(Ferroelectric Liquid Crystal;FLC)等。
發(fā)展前景
電泳顯示(Electrophoretic,E-Paper)技術(shù)由于結(jié)合了普通紙張和電子顯示器的優(yōu)點(diǎn),是最有可能實(shí)現(xiàn)電子紙張產(chǎn)業(yè)化的技術(shù)。它已從眾多顯示技術(shù)中脫穎而出,成為極具發(fā)展?jié)摿Φ娜嵝噪娮语@示技術(shù)之一。據(jù)iSuppli預(yù)測(cè),電泳顯示全球市場2006年僅僅900萬美元,但是預(yù)計(jì)到2013年將增加到2.47億美元,年均增長率高達(dá)60.5%。該增長的大部分市場在指示標(biāo)和新穎的直接驅(qū)動(dòng)顯示器,另外電子顯示卡、柔性電子閱讀器、電子紙張和數(shù)字簽字等產(chǎn)品也將獲得應(yīng)用。
電泳技術(shù)及其優(yōu)勢(shì)
何為電泳技術(shù)?照字面意味著“在一定的電壓下可泳動(dòng)”,其顯示的工作原理是靠浸在透明或彩色液體之中的電離子移動(dòng),即通過翻轉(zhuǎn)或流動(dòng)的微粒子來使像素變亮或變暗,并可以被制作在玻璃、金屬或塑料襯底上。具體技術(shù)是將直徑約為1mm的二氧化鈦粒子被散布在碳?xì)溆椭?,黑色染料、表面活性劑以及使粒子帶電的電荷控制劑也被加到碳?xì)溆椭?;這種混合物被放置在兩塊間距為10—100mm的平行導(dǎo)電板之間,當(dāng)對(duì)兩塊導(dǎo)電板加電壓時(shí),這些粒子會(huì)以電泳的方式從所在的薄板遷移到帶有相反電荷的薄板上。當(dāng)粒子位于顯示器的正面(顯示面)時(shí),顯示屏為白色,這是因?yàn)楣馔ㄟ^二氧化鈦粒子散射回閱讀者一方;當(dāng)粒子位于顯示器背面時(shí),顯示器為黑色,這是因?yàn)椴噬玖衔樟巳肷涔狻H绻麑⒈趁娴碾姌O分成多個(gè)微小的圖像元素(像素),通過對(duì)顯示器的每個(gè)區(qū)域加上適當(dāng)?shù)碾妷簛懋a(chǎn)生反射區(qū)和吸收區(qū)圖案,即可形成圖像。
電泳技術(shù)具有幾大優(yōu)勢(shì)。一是能耗低。由于具有雙穩(wěn)定性,在電源被關(guān)閉之后,仍然在顯示器上將圖像保留幾天或幾個(gè)月。二是電泳技術(shù)生產(chǎn)的顯示器屬于反射型,因此具有良好的日光可讀性,同樣也可以跟前面或側(cè)面的光線結(jié)合在一起,用于黑暗環(huán)境。三是具有低生產(chǎn)成本的潛力,因?yàn)樵摷夹g(shù)不需要嚴(yán)格的封裝,并且采用溶液處理技術(shù)如印刷是可行的。四是電泳顯示器以形狀因子靈活為特色,容許它們被制造在塑料、金屬或玻璃表面上,所以它是柔性顯示技術(shù)的最佳選擇。
電泳技術(shù)研發(fā)與生產(chǎn)企業(yè)
投入電泳技術(shù)開發(fā)的企業(yè)有美國E—Ink和SiPix公司、英國Plastic Logic、荷蘭飛利浦旗下Polymer Vision、日本Bridgestone、Hitachi、Seiko Epson、南韓三星電子與樂金飛利浦(LPL)等廠商。
E-Ink公司在產(chǎn)品開發(fā)方面走在最前面。2004年E-Ink公司與索尼公司和飛利浦公司聯(lián)合于推出電泳顯示電子書,在歐洲與德國的Vossloh公司聯(lián)合推出了電子紙信息顯示屏,與韓國的Neolux公司聯(lián)合推出了電子紙式廣告屏。SiPix公司和日本的Bridgestone公司聯(lián)合展示了一些電泳顯示屏樣屏,但還沒有產(chǎn)品推出。
2007年E—Ink與Seiko合作推出了可彎曲的手表外,E—Ink與Sony、大陸金科、臺(tái)灣eREAD等公司合作推出了電子書;諾基亞發(fā)布了概念手機(jī)Nokia888;香港o.d.m.公司推出柔性手表、數(shù)字卷標(biāo)等產(chǎn)品;三星電子與LPL則在電泳顯示介質(zhì)上加裝彩色濾光片,形成彩色化,不過也因?yàn)樵黾恿瞬噬珵V光片,讓其推出的產(chǎn)品因反射率降低而看來亮度有些暗淡。荷蘭Polymer Vision積極投入電子紙與全彩柔性顯示器產(chǎn)品的技術(shù)開發(fā),已在英國設(shè)立生產(chǎn)廠,預(yù)計(jì)在2007年底可開始正式量產(chǎn),屆時(shí)并將推出全球首款折迭式電子書。
各公司在電泳技術(shù)方面略有差異。E—Ink采用的是微結(jié)構(gòu)(Micro Structure)屬于微膠囊(Microcapsules),每個(gè)顯示元素的大小不均且排列零散,因采用黑白雙粒子,光反射率較佳是其優(yōu)點(diǎn),可達(dá)到約35%~40%左右,閱讀時(shí)的感覺更貼近真正的紙張,缺點(diǎn)則是不夠堅(jiān)固強(qiáng)韌,無法承受重壓。而SiPix公司采用的微結(jié)構(gòu)則是專利的微杯數(shù)組(Microcup—Array),顯示元素大小一致并以數(shù)組方式排列整齊,具有較佳的機(jī)械與電氣特性,承受重壓也不會(huì)損壞,缺點(diǎn)則是光反射率稍差,約可達(dá)到28%。由于在技術(shù)上采用的微結(jié)構(gòu)不同,連帶也影響到制程的選擇。有關(guān)專家指出:SiPix的微杯數(shù)組結(jié)構(gòu)最大好處,在于可以使用連續(xù)滾動(dòng)條式(Roll to Roll;R2R)的制程可實(shí)現(xiàn)大批量產(chǎn),生產(chǎn)成本較低;反觀E—Ink的微膠囊結(jié)構(gòu)由于不夠堅(jiān)固,因此無法實(shí)行以壓印方式生產(chǎn)的R2R制程,只能以較高的成本噴墨方式制造生產(chǎn)。
面臨的技術(shù)難題
一是響應(yīng)速度比較慢。因?yàn)殡娪炯夹g(shù)依賴于粒子的運(yùn)動(dòng),用于顯示的開關(guān)時(shí)間非常長,長達(dá)幾百毫秒,這個(gè)速度對(duì)視頻應(yīng)用是不夠的。用于電泳顯示的使開關(guān)時(shí)間達(dá)到幾十毫秒的更快的材料正在開發(fā)之中。
二是顯示的雙穩(wěn)態(tài)、以及轉(zhuǎn)換速度慢,也影響了其連續(xù)顯示色彩的性能。一些電泳顯示器在兩種色彩之間切換,如果彩色顯示還需要一個(gè)彩色濾光片。該技術(shù)的驅(qū)動(dòng)器正因雙穩(wěn)定性問題而面臨挑戰(zhàn),雙穩(wěn)定性對(duì)顯示有利,但它也給帶來了挑戰(zhàn),因?yàn)樗枰捎靡环N獨(dú)立的驅(qū)動(dòng)器架構(gòu),從而導(dǎo)致顯示器的成本上升。
三是制造工藝復(fù)雜,對(duì)材料要求高,成本較高。
我國電泳顯示技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀
我國電泳顯示研究起步晚,但進(jìn)步很快,在材料研究及其應(yīng)用基礎(chǔ)研究方面有基礎(chǔ),并已有企業(yè)在積極開拓相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)。例如中山大學(xué)和廣州奧示科技有限公司合作,研制出黑白、紅綠藍(lán)彩色三原色電子墨水,并研制出了柔性顯示屏,制作出了彩色三原色的顯示屏。國內(nèi)與國外的技術(shù)差距主要在顯示屏、材料和功能產(chǎn)品方面。我國企業(yè)從發(fā)展自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的平板顯示屏制作技術(shù)和產(chǎn)品出發(fā),利用自主開發(fā)的微膠囊電泳顯示材料和超薄平板顯示器件結(jié)構(gòu),開展電子墨水超薄平板顯示器件產(chǎn)業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)攻關(guān),研制出了類紙式信息顯示屏,實(shí)現(xiàn)電泳平板顯示器件產(chǎn)品化。我國臺(tái)灣工研院也已鎖定 柔性顯示為未來幾年的發(fā)展重點(diǎn),并且正與SiPix進(jìn)行相關(guān)技術(shù)合作。
瞄準(zhǔn)未來市場,研究未來產(chǎn)業(yè)發(fā)展,開發(fā)新技術(shù),超前謀劃,是當(dāng)前我國顯示產(chǎn)業(yè)持續(xù)發(fā)展的重中之重的工作。2100433B
MVA(Multi-domain Vertical Alignment)面板是利用突出物使液晶靜止時(shí)并非傳統(tǒng)的直立式,而是偏向某一個(gè)角度靜止。
多疇垂直配向
MVA(Multi-domain Vertical Alignment)面板是利用突出物使液晶靜止時(shí)并非傳統(tǒng)的直立式,而是偏向某一個(gè)角度靜止;當(dāng)施加電壓讓液晶分子改變成水平以讓背光通過則更為快速,這樣便可以大幅度縮短顯示時(shí)間,也因?yàn)橥怀鑫锔淖円壕?0ms以內(nèi)。分子配向,讓視野角度更為寬廣。在視角的增加上可達(dá)160度以上,反應(yīng)時(shí)間短。
MVA面板技術(shù)是日本富士通轉(zhuǎn)讓給臺(tái)灣奇美和友達(dá)兩家公司的。金融危機(jī)發(fā)生后,廣角面板生產(chǎn)企業(yè)都遇到了危機(jī),臺(tái)灣奇美友達(dá)感覺MVA面板生產(chǎn)成本高,顯示器利潤低,所以停止給顯示器廠家供貨。而韓國三星和LG則非常有市場頭腦,推出了低成本版的C-PVA和E-IPS,用價(jià)格和TN差別不大的低成本廣角面板一舉占領(lǐng)了過去MVA的市場。臺(tái)灣人把市場拱手相讓,只能夠怪他們自己了。唯一讓消費(fèi)者不爽就是市場上買不到新MVA面板顯示器了。