色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)標準化發(fā)展

色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 的準確性直接影響到分析結果的通用性和可比性，這已經(jīng)引起了許多國際性大公司的高度重視?？梢灶A見，對數(shù)據(jù)處理工作站的驗證將越來越集中到軟件方面。輸出統(tǒng)一的數(shù)據(jù)記錄格式是色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)實現(xiàn)分析結果的通用性和可比性的基礎。為了在真正意義上用黑盒測試的方法對色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的積分算法進行校準，就必須采用統(tǒng)一的數(shù)據(jù)記錄格式，要求各工作站必須能讀取統(tǒng)一格式的數(shù)據(jù)文件。色譜數(shù)據(jù)處理結果的準確性不僅表現(xiàn)在實時處理當中，而且還表現(xiàn)在其存儲數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性上。保存的譜圖數(shù)據(jù)是未經(jīng)任何平滑處理的原始采樣數(shù)據(jù)，完全保留譜圖中的細節(jié)信息，能夠如實再現(xiàn)原始譜圖。良好實驗室規(guī)范(GLP)的一個重要準則即能夠追溯并重現(xiàn)以前的實驗結果。這就要求我們必須使用通用數(shù)據(jù)儲存格式，或可以把譜圖數(shù)據(jù)轉換為統(tǒng)一的數(shù)據(jù)格式。用戶可以方便地與他人共享并處理數(shù)據(jù)，而不受儀器工作站的限制。2100433B

色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)軟件具備下列功能：

定義 色譜分析方法及相關信息方法庫，用戶可以將某些方法存入方法庫，需要時直接從方法庫中調(diào)用；分析對象序列功能可以為序列中的每一個分析對象定義自己的分析方法，使之按自己預先定義好的方法運行；實現(xiàn)了對泵、自動進樣器、進樣閥等部件的控制；色譜數(shù)據(jù)處理包括色譜積分和定量計算，保存色譜運行過程中及譜圖再處理所產(chǎn)生的結果數(shù)據(jù)和其他信息；方便地將色譜圖、積分結果、定量計算結果及其它信息輸出報告；為進一步處理和管理試驗數(shù)據(jù)，提供和其他應用軟件或信息管理系統(tǒng)對接的數(shù)據(jù)接口，如提供CDF文件格式，將有關信息復制到剪切板等；用戶管理功能，給不同用戶賦予不同權限，高級用戶可以進行色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)所具備的所有操作，而普通用戶只能進行數(shù)據(jù)的訪問和輸出，以防止非色譜操作人員對色譜數(shù)據(jù)的刪除和更改等。

數(shù)據(jù)采集與處理是色譜分析中非常重要的部分，在色譜發(fā)展初期，一般由記錄儀記錄色譜信號，而由色譜工作者測量色譜峰，該工作不僅速度慢，勞動強度高且主觀性比較強。隨后在70年代初，積分儀的出現(xiàn)大大提高了色譜分析的效率和準確性，但它僅能存儲當前色譜圖，用戶無法對以前的色譜圖進行再處理(如改變色譜數(shù)據(jù)處理參數(shù)等)；而隨著計算機技術的迅猛發(fā)展，基于Pc機的色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)迅速發(fā)展起來，已成為色譜系統(tǒng)的常規(guī)組成部分。它不僅可以完全替代積分儀的功能，而且可以對儀器進行控制，自動存儲，網(wǎng)上數(shù)據(jù)共享，生成圖文并茂的用戶報告等眾多積分儀無法完成的功能。

色譜柱是進行色譜分析的主要儀器，色譜柱的正確安裝才能保證發(fā)揮其最佳的性能和延長使用壽命。 正確的安裝請參考以下步驟：

步驟1. 檢查氣體過濾器、載氣、進樣墊和襯管等檢查氣體過濾器和進樣墊，保證輔助氣和檢測器的用氣暢通有效。如果以前做過較臟樣品或活性較高的化合物，需要將進樣口的襯管清洗或更換。

步驟2. 將螺母和密封墊裝在色譜柱上，并將色譜柱兩端要小心切平

步驟3. 將色譜柱連接于進樣口上色譜柱在進樣口中插入深度根據(jù)所使用的GC儀器不同而定。正確合適的插入能最大可能地保證試驗結果的重現(xiàn)性。通常來說，色譜柱的入口應保持在進樣口的中下部，當進樣針穿過隔墊完全插入進樣口后如果針尖與色譜柱入口相差1-2cm，這就是較為理想的狀態(tài)。（具體的插入程度和方法參見所使用GC的隨機手冊）避免用力彎曲擠壓毛細管柱，并小心不要讓標記牌等有鋒利邊緣的物品與毛細柱接觸摩擦，以防柱身斷裂受損。將色譜柱正確插入進樣口后，用手把連接螺母擰上，擰緊后（用手擰不動了）用扳手再多擰1/4-1/2圈，保證安裝的密封程度。因為不緊密的安裝，不僅會引起裝置的泄漏，而且有可能對色譜柱造成永久損壞。

步驟4. 接通載氣當色譜柱與進樣口接好后，通載氣, 調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速（見下表）。

以上僅為建議的起始設置，具體數(shù)值要依據(jù)實際的載氣流速。將色譜柱的出口端插入裝有己烷的樣品瓶中，正常情況下，我們可以看見瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒有氣泡，就要重新檢查一下載氣裝置和流量控制器等是否正確設置，并檢查一下整個氣路有無泄漏。等所有問題解決后，將色譜柱出口從瓶中取出，保證柱端口無溶劑殘留，再進行下一步的安裝。

步驟5. 將色譜柱連接于檢測器上其安裝和所需注意的事項與色譜柱與進樣口連接大致相同。如果在應用中系統(tǒng)所使用的是ECD或NPD等，那么在老化色譜柱時，應該將柱子與檢測器斷開，這樣檢測器可能會更快達到穩(wěn)定。

步驟6. 確定載氣流量，再對色譜柱的安裝進行檢查注意：如果不通入載氣就對色譜柱進行加熱，會快速且永久性的損壞色譜柱。

步驟7. 色譜柱的老化色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后，就可以對色譜柱進行老化了。

對色譜柱升至一恒定溫度，通常為其溫度上限。特殊情況下，可加熱至高于最高使用溫度10-20℃左右，但是一定不能超過色譜柱的溫度上限，那樣極易損壞色譜柱。當?shù)竭_老化溫度后，記錄并觀察基線。初始階段基線應持續(xù)上升，在到達老化溫度后5-10分鐘開始下降，并且會持續(xù)30-90分鐘。當?shù)竭_一個固定的值后就會穩(wěn)定下來。如果在2-3小時后基線仍無法穩(wěn)定或在15-20分鐘后仍無明顯的下降趨勢，那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染。遇到這樣的情況，應立即將柱溫降到 40℃以下，盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關的問題。如果還是繼續(xù)的老化，不僅對色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。

一般來說，涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時間長，而弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需時間較短。而PLOT色譜柱的老化方法有各不相同。 PLOT柱的老化步驟:HLZ Pora 系列 250℃， 8小時以上Molesieve分子篩 300℃ 12小時Alumina氧化鋁 200℃ 8小時以上由于水在氧化鋁和分子篩PLOT柱中的不可逆吸附，使得這兩種色譜柱容易發(fā)生保留行為漂移。

當柱子分離過含有高水分樣品后，需要將色譜柱重新老化，以除去固定相中吸附的水分。

步驟8. 設置確認載氣流速對于 毛細管色譜柱，載氣的種類首選高純度氮氣或氫氣。載氣的純度最好大于99.995%，而其中的含氧量越少越好。如果您使用的是 毛細管色譜柱，那么依照載氣的平均線速度（cm/sec）,而不是利用載氣流量（ml/min）來對載氣做出評價。因為柱效的計算采用的是載氣的平均線速度。推薦平均線速度值：氮氣：10-12cm/sec 氫氣：20-25cm/sec載氣雜質(zhì)過濾器在載氣的管線中加入氣體過濾裝置不僅可以延長色譜柱壽命，而且很大程度的降低了背景噪音。建議最好安裝一個高容量脫氧管和一個載氣凈化器。使用ECD系統(tǒng)時，最好能在其輔助氣路中也安裝一個脫氧管。

步驟9. 柱流失檢測在色譜柱老化過程結束后，利用程序升溫作一次空白試驗（不進樣）。一般是以10℃/min從50℃升至最高使用溫度，達到最高使用溫度后保持 10min。這樣我們就會的到一張流失圖。這些數(shù)值可能對今后作對比試驗和實驗問題的解決有幫助?？瞻自囼灥纳V圖，不應該有色譜峰出現(xiàn)。如果出現(xiàn)了色譜峰，通?？赡苁菑倪M樣口帶來的污染物。如果在正常的使用狀態(tài)下，色譜柱的性能開始下降，基線的信號值會增高。另外，如果在很低的溫度下，基線信號值明顯的大于初始值，那么有可能是色譜柱和　GC系統(tǒng)有污染。其他：色譜柱的保存用進樣墊將色譜柱的兩端封住，并放回原包裝。在安裝時要將色譜柱的兩端截去一部分，保證沒有進樣墊的碎屑殘留于柱中。

注意：當空氣中氫氣的含量在4-10%時，就有爆炸的危險。所以一定要保證實驗室有良好的通風系統(tǒng)。 2100433B

色譜法的應用可以根據(jù)目的分為制備性色譜和分析性色譜兩大類。

制備性色譜的目的是分離混合物，獲得一定數(shù)量的純凈組分，這包括對有機合成產(chǎn)物的純化、天然產(chǎn)物的分離純化以及去離子水的制備等。相對于色譜法出現(xiàn)之前的純化分離技術如重結晶，色譜法能夠在一步操作之內(nèi)完成對混合物的分離，但是色譜法分離純化的產(chǎn)量有限，只適合于實驗室應用。

分析性色譜的目的是定量或者定性測定混合物中各組分的性質(zhì)和含量。定性的分析性色譜有薄層色譜、紙色譜等，定量的分析性色譜有氣相色譜、高效液相色譜等。色譜法應用于分析領域使得分離和測定的過程合二為一，降低了混合物分析的難度縮短了分析的周期，是比較主流的分析方法。在中華人民共和國藥典中，共有超過約600種化學合成藥和超過約400種中藥的質(zhì)量控制應用了高效液相色譜的方法。

色譜乙腈相對其他試劑的特點：

色譜乙腈技術參數(shù)：