紫毛野牡丹繁殖方法

• 材料

紫毛野牡丹種子。

• 培養(yǎng)條件

①M(fèi)S。復(fù)壯培養(yǎng)基：②MS 6-BA1.0毫克/升 NAA0.5毫克/升。誘導(dǎo)培養(yǎng)基：③MS 6-BA1.0毫克/升 NAA0.1毫克/升。繼代增殖培養(yǎng)基：④MS 6-BA2.0毫克/升 NAA0.1毫克/升；⑤MS 6-BA3.0毫克/升 NAA0.1毫克/升。生根培養(yǎng)基：⑥1/2MS IBA0.2毫克/升；⑦1/2MS NAA0.2毫克/升。以上培養(yǎng)基都附加30克/升蔗糖和6.5克/升瓊脂粉，p小時(shí)為5.5-5.8。培養(yǎng)溫度為（25±2）℃，光照強(qiáng)度為40-50微摩爾·平方米·秒，光照時(shí)間為14小時(shí)/天。

• 無菌材料的獲得

用軟刷蘸肥皂水輕刷紫毛野牡丹果實(shí)表面，用流水沖洗2小時(shí)，再用超純水沖洗2-3遍后轉(zhuǎn)到接種室。在超凈工作臺(tái)上，剖開果皮，收集種子，先以70%酒精浸泡30秒，無菌水沖洗3次；繼以升汞消毒8分鐘，無菌水沖洗5次。接種到種子萌發(fā)培養(yǎng)基①上。

• 種子萌發(fā)與壯苗培養(yǎng)

接種10天后，陸續(xù)有種子萌發(fā)，25天后大部分種子均萌發(fā)，將萌發(fā)植株的胚根切除，轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基②上，30天后，植株高度達(dá)到4-6厘米。

• 不定芽誘導(dǎo)

在超凈工作臺(tái)上取出復(fù)壯的植株，將其切成1.0-1.5厘米的帶芽莖段，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基③上，20天后不定芽分化。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)帶頂芽莖段誘導(dǎo)率較低，僅為2.5，不帶頂芽莖段不定芽誘導(dǎo)率達(dá)到3.7。

• 繼代增殖

將叢生芽分離，分別接種于增殖培養(yǎng)基④和⑤上，約25天后每個(gè)芽可分化出4-5個(gè)芽，35天后在培養(yǎng)基④和⑤上分別繼代一次，均可生成大量叢生芽。2種培養(yǎng)基比較來看：培養(yǎng)基⑤增殖系數(shù)較高，達(dá)到5.3，但其基部出現(xiàn)大量愈傷組織，芽較弱，生長(zhǎng)較慢；培養(yǎng)基④上的芽生長(zhǎng)較快且粗壯，增殖系數(shù)達(dá)到4.5。

• 生根與移栽

將繼代后的不定芽切成約3厘米的小段，分別轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基⑥和⑦上進(jìn)行生根培養(yǎng)。15天后基部分化出3-5條白色根，平均生根率分別達(dá)到94.0%和92.3%。當(dāng)根長(zhǎng)達(dá)到2.5厘米時(shí)，采取逐步開口煉苗法，煉苗8天后，出瓶洗去培養(yǎng)基，將試管苗移栽到滅過菌的基質(zhì)中，保持適宜濕度，成活率達(dá)到80.2%。

分布于中國和菲律賓；在中國僅分布于海南省東方、樂東、保亭、昌江等地。生長(zhǎng)于海拔380-1300米的山坡密林下。 海南紫毛野牡丹灌叢群落分布于俄賢嶺石灰?guī)r山頂附近有較多土壤的地方，強(qiáng)光及干燥的環(huán)境，形成了植被特殊的灌叢狀態(tài)。

灌木，高達(dá)1米；莖、小枝、花梗、花萼及葉柄均密被外反的淡紫色長(zhǎng)粗毛，毛基部略膨大。葉片堅(jiān)紙質(zhì)或略厚，卵狀長(zhǎng)圓形至橢圓形，頂端急尖或漸尖，基部圓形或微心形，長(zhǎng)7-14厘米，寬2.5-6厘米，全緣，具緣毛，基，出脈5，葉面被緊貼的糙伏毛，毛基部隱藏于表皮下，基出脈下凹，側(cè)脈不明顯，背面被糙伏毛，基出脈及側(cè)脈均隆起，側(cè)脈互相平行；葉柄長(zhǎng)1-3厘米。

傘房花序，軸極短或幾無，有花3-5朵，基部具總苞2，披針形，外面密被糙伏毛，里面僅上半部被糙伏毛，花梗長(zhǎng)約1厘米，花萼管長(zhǎng)約1厘米，裂片線狀披針形，長(zhǎng)12-14毫米，裂片間具鉆形小裂片，裂片被長(zhǎng)粗毛，頂部具1束髯毛，花后均與花瓣同時(shí)脫落；花瓣紫紅色，菱狀倒卵形，上部偏斜，長(zhǎng)約2.5厘米，寬約1.8厘米；雄蕊未詳，子房頂端被毛。蒴果壇狀球形，長(zhǎng)1-1.3厘米，直徑0.8-1.2厘米；宿存萼近頂端縊縮成短頸，被平展的疏長(zhǎng)硬毛，紫紅色或紫色?；ㄆ?-4月，果期11月至翌年1月。

種群現(xiàn)狀：隨著生境的惡化，紫毛野牡丹的生存受到極大的威脅，種群數(shù)量急劇減少。野牡丹科植物越來越受到人們的關(guān)注，其園林開發(fā)也有進(jìn)展，紫毛野牡丹的研究?jī)H見種子萌發(fā)與貯藏特性研究。 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)副教授張榮京博士近日在《植物科學(xué)學(xué)報(bào)》發(fā)表論文指出，要大力保護(hù)這種海南獨(dú)有的珍貴野生園林花卉資源。因此，應(yīng)根據(jù)石灰?guī)r地區(qū)生境的特殊性加強(qiáng)保護(hù)與管理。

保護(hù)措施：張榮京博士建議，通過增加傳粉昆蟲，提高紫毛野牡丹的繁殖能力；也可以采用快速繁殖方法進(jìn)行繁育，通過擴(kuò)大其種群數(shù)量，以減輕野生種群的生存壓力，在發(fā)掘其觀賞價(jià)值的同時(shí)進(jìn)行更好地保護(hù)。

食用：紫毛野牡丹的果可食。

藥用：葉和根可以入藥，味苦，性平，人心、脾、大腸經(jīng)。具有收斂止血。主治炭疽、紅痢癥。

觀賞：紫毛野牡丹花大色艷、花期長(zhǎng)、葉兩面密被紫紅色絨毛，具有較高的觀賞價(jià)值，可廣泛用于園林造景或盆栽觀賞。 2100433B