醋酸丙氨瑞林測定方法

方法名稱:

醋酸丙氨瑞林-醋酸丙氨瑞林的測定-高效液相色譜法

應(yīng)用范圍:

本方法采用高效液相色譜法測定醋酸丙氨瑞林的含量。

本方法適用于醋酸丙氨瑞林。

方法原理:

供試品用流動相溶解并稀釋成一定濃度的溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處檢測醋酸丙氨瑞林的吸收值，計算出其含量。

試劑:

1. 乙腈(色譜純)

2. 水(色譜純)

3. 磷酸溶液:0.01mol/L

4. 三乙胺

儀器設(shè)備:

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按醋酸丙氨瑞林計算應(yīng)不低于 2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相:0.01mol/L磷酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.0):乙腈= 80 20

2.2 檢測波長:220nm

2.3 柱溫:室溫

試樣制備:

1. 對照品溶液的制備

精密稱取醋酸丙氨瑞林對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋成每1mL中含0.5mg的溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密稱取本品適量，加流動相溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液。

注:"精密稱取"系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一。"精密量取"系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟:

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處測定醋酸丙氨瑞林的吸收值，計算出其含量。

參考文獻:

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部，p837。

照高效液相色譜法(附錄Ⅴ D)測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.1mol/L磷酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至 3.0)-乙腈(80:20)為流動相;檢測波長為220nm。理論板數(shù)按醋酸丙氨瑞林峰計算不低于2000。 測定法 取本品適量，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.5mg的溶液，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖;另取醋酸丙氨瑞林對照品，同法測定.按外標法以峰面積計算，即得。

溶液的澄清度與顏色 取本品20mg，加水2ml溶解后，溶液應(yīng)澄清無色;如顯色，與黃色2號標準比色液(附錄Ⅸ A)比較，不得更深。 醋酸 取本品適量，精密稱定，加稀釋液〔流動相A-流動相B(95:5)〕溶解并稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液，作為供試品溶液;另取冰醋酸適量，精密稱定，加稀釋液稀釋制成每1ml中約含0.60mg的溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜治(附錄Ⅴ D)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以磷酸溶液(取磷酸0.7ml，加水1000ml，用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至3.0)為流動相A，甲醇為流動相B，進行梯度洗脫，檢測波長為210nm。理論板數(shù)按醋酸峰計算，不低于2000。梯度洗脫程序如下: 時間(分鐘) 流動相A(%) 流動相B(%) 0 95 5 5 50 50 20 50 50 25 95 5 精密量取對照品溶液和供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算。含醋酸不得過7.5%。 氨基酸比值 取本品，加6mol/L鹽酸溶液，于110℃水解24小時后，用氨基酸分析儀式適宜的高效液相色譜儀測定，供試品中各氨基酸與丙氨酸摩爾比應(yīng)符合以下規(guī)定:絲氨酸為0.7-1.0，谷氨酸為0.9-1.1，脯氨酸為0.8-1.0，亮氨酸為0.9-1.1，酪氨酸為0.9-1.1，組氨酸為0.9-1.1，精氨酸為0.9-1.1。 有關(guān)物質(zhì) 取本品，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作為供試品溶液;精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照含量測定項下的色譜條件，取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰高約為滿量程的50%;精密量取對照品溶液和供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍，供試品溶液的色譜圖中，除溶劑峰外，單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液峰面積的2倍.各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液峰面積的5倍(任何小于對照溶液主成分峰面積0.05倍的峰可忽略不計)。 水分 取本品，依法測定(附錄Ⅷ M第一法A)。含水分不得過7.0%。

(1)在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應(yīng)與對照品溶液主峰的保留時間一致。 (2)取本品與醋酸丙氨瑞林對照品，分別加水制成每1ml中約含2mg的溶液，照薄層色譜法(附錄 B)試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-冰醋酸-水(60:45:6:14)為展開劑，展開，晾干，熏氯氣(在一容器底部，放一燒杯，加入5%高錳酸鉀溶液10ml，再加鹽酸3ml，密閉)，晾干，再噴以碘化鉀淀粉指示液使顯色，供試品溶液所顯主斑點的顏色和位置應(yīng)與對照品溶液的斑點相同。

漢語拼音: Cusuan Bing anruilin

英文名: Alarelin Acetate

吸收系數(shù) 取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.1mg的溶液，照紫外-可見分光光度法(附錄ⅣA)，在279nm的波長處測定吸光度，按無水、無醋酸物計算，吸收系數(shù)(E 1%/1cm)為52-57。

遮光、密封，在干燥處保存。

注射用醋酸丙氨瑞林

本品為5-氧代脯氨酰-組氨酰-色氨酰-絲氨酰-酪氨酰-D-內(nèi)氨酰-亮氨酰-精氨酰-脯氨酰-乙胺的醋酸鹽。按無水、無醋酸物計算，含C56H78N18O12應(yīng)為95.0%-103.0%