乳膠凝集法

乳膠凝集法可用于豬圓環(huán)病毒的快速檢測(cè) 。本方法在實(shí)際應(yīng)用方面具有顯著的優(yōu)勢(shì): 靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測(cè)成本低、操作簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果穩(wěn)定。同其它檢測(cè)方法相比，本方法不需要專業(yè)技術(shù)，檢測(cè)耗時(shí)短，更適用于PCV2 的早期診斷和大規(guī)模的臨床檢測(cè)，對(duì)減少養(yǎng)豬業(yè)的損失意義重大。

乳膠凝集法還可快速檢出耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA) ，這對(duì)臨床及時(shí)使用有效的藥物進(jìn)行治療，防止院內(nèi)交叉感染有重要指導(dǎo)意義。苯唑西林鹽瓊脂篩選平皿法檢出MRSA需要一到兩天的時(shí)間，而PBP-2a乳膠凝集法檢出一例MRSA只需不到30分鐘的時(shí)間，其原理是加熱裂解將MRSA中的PBP-2a提取出來(lái)，加入PBP-2a特異性單克隆抗體致敏的乳膠顆粒溶液，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的特異性凝集現(xiàn)象。本實(shí)驗(yàn)中兩種方法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合率為100%，說(shuō)明PBP-2a乳膠凝集法完全可以作為臨床微生物實(shí)驗(yàn)室快速篩查 MRSA 的方法。

乳膠凝集法在檢測(cè)麻疹病毒Ig-M抗體也有較好應(yīng)用 。由于非特異的前驅(qū)癥狀和輕型麻疹病例的存在,僅依據(jù)臨床表現(xiàn)診斷麻疹是不可靠的。隨著麻疹發(fā)病的減少,許多臨床醫(yī)師未見(jiàn)過(guò)麻疹或無(wú)診斷麻疹的經(jīng)驗(yàn)。急需實(shí)驗(yàn)室診斷方法來(lái)鑒別麻疹和與其臨床表現(xiàn)相類似的其它疾病。麻疹在嬰幼兒中的誤診更常見(jiàn),爆發(fā)的病例比散發(fā)病例更需要實(shí)驗(yàn)室的確認(rèn)。與麻疹相似的疾病很多,例如:風(fēng)疹、登革熱、?？?、柯薩奇、人類小脫氧核糖核酸(DNA)病毒B19、皰疹6型病毒等感染引起的疾病[8]。間接ELISA法比捕捉ELISA法的實(shí)驗(yàn)流程簡(jiǎn)單,該法已被一些國(guó)家廣泛應(yīng)用。但間接法血清需預(yù)處理,吸去IgG抗體,問(wèn)題是IgG抗體吸附不完全時(shí),可導(dǎo)致結(jié)果不可信。麻疹I(lǐng)gM抗體捕捉ELISA法和噬斑減少中和實(shí)驗(yàn)相比,在檢測(cè)疫苗免疫后嬰兒IgM抗體敏感性達(dá)到97%。在臨床證實(shí)的病例中,捕捉法的敏感性和特異性分別達(dá)到91.8%和98.2%[8]。陽(yáng)性和陰性的可信度分別為98.2%和92.0%。市場(chǎng)上有許多種ELISA法捕捉IgM抗體試劑盒,但質(zhì)量差別很大,不是所有的試劑盒都能達(dá)到高敏感性和特異性。

乳膠凝集IgM-PA法、捕捉ELISA法和間接ELISA法都只需要1份血清即可診斷病例,ELISA法已大量用于麻疹的實(shí)驗(yàn)室診斷。結(jié)果提示,三種方法檢測(cè)麻疹可疑病例的陽(yáng)性檢出率相似,差異無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IgM-PA法檢測(cè)麻疹可疑病例的敏感性為100%,特異性為90%。檢測(cè)正常兒童血清的特異性為100%,可能IgM-PA法比ELISA法更敏感,可檢測(cè)出麻疹可疑病例中的微量抗體。IgM-PA法實(shí)際應(yīng)用時(shí),只做4個(gè)滴度定性即可。一塊96孔酶標(biāo)免疫板上可做24份標(biāo)本,使成本降低。PA法不需要特別的儀器設(shè)備,操作簡(jiǎn)單,不需特別的技術(shù)和培訓(xùn),酶標(biāo)板可重復(fù)使用,結(jié)果快速。IgM-PA法易在地區(qū)和縣級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)開(kāi)展,利于全國(guó)麻疹實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)的建設(shè)。