原丙酸三乙酯

以提高3-羥基丙酸的產(chǎn)量為目標(biāo),對實驗室構(gòu)建的基因工程大腸桿菌進(jìn)行改造,敲除形成副產(chǎn)物1,3-丙二醇的主要酶基因——乙醛脫氫酶基因yqh D,得到E.coli W3110Δyqh D(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),該工程菌搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達(dá)到2.53 g/L,相比未敲除yqh D基因的菌株,產(chǎn)量提高了5.8倍。另外,敲除了甘油代謝途徑中的抑制因子glpR基因,得到E.coli W3110ΔglpR(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),該工程菌搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達(dá)到2.86 g/L,相比未敲除glpR基因的菌株,產(chǎn)量提高了6.7倍。后經(jīng)5 L罐發(fā)酵培養(yǎng)后,3-羥基丙酸的產(chǎn)量提升到15.4 g/L。該實驗為進(jìn)一步利用大腸桿菌工程菌發(fā)酵生產(chǎn)3-羥基丙酸提供了研究基礎(chǔ)。

【目的】2，4，6-三甲基苯叉丙二酸二乙酯是合成除草劑肟草酮的關(guān)鍵中間體，前人報道的合成方法收率低，而本文報道了新的合成工藝并研究了催化劑種類、用量、原料摩爾比、反應(yīng)時間和共沸脫水時間對收率的影響?！窘Y(jié)果】以哌啶為催化劑，物料比n（2,4，6-三甲基苯甲醛）：n（丙二酸二乙酯）為1：1．5，哌啶用量與2，4，6-三甲基苯甲醛等摩爾，回流4h后，苯共沸脫水4h，收率可達(dá)到97．7％（以2，4，6-三甲基苯甲醛計）；用IR、^1HRMR、元素分析表征了其結(jié)構(gòu)。[結(jié)論]在最優(yōu)條件下，以哌啶為催化劑，2，4，6-三甲基苯甲醛與丙二酸二乙酯通過Knoevenagel縮合高收率獲得2．4．6-三甲基苯叉丙二酸二乙酯。