薄層[色譜]掃描儀

薄層色譜掃描儀是對(duì)薄層色譜進(jìn)行定量檢測(cè)分析的儀器，當(dāng)前市場(chǎng)上有兩類薄層色譜掃描儀:

是一種全波長(zhǎng)掃描儀，提供波長(zhǎng)200-800nm范圍的可選波長(zhǎng)，通過(guò)檢測(cè)樣品對(duì)光的吸收強(qiáng)弱確定物質(zhì)含量。該掃描儀也能檢測(cè)254nm或365nm紫外照射產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度，從而進(jìn)行特異性檢測(cè)。

傳統(tǒng)掃描儀的掃描方式分為:單光束掃描、雙光束掃描和雙波長(zhǎng)掃描。

單光束掃描:采用單一光束(即單一波長(zhǎng)掃描)，其結(jié)果就是上圖中一特定波長(zhǎng)條件下的單條曲線。儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，但是基線不穩(wěn)，實(shí)際中很少使用。

雙光束掃描:采用同一波長(zhǎng)的兩個(gè)光束同步掃描，一個(gè)光束掃描樣品展開通道，另一個(gè)光束掃描樣品通道旁邊的空白區(qū)域，這樣就可扣除空白吸收，部分消除薄層板展開方向鋪板不均勻產(chǎn)生的誤差。但是無(wú)法消除垂至于展開方向鋪板不均勻產(chǎn)生的誤差。

雙波長(zhǎng)掃描:兩個(gè)不同波長(zhǎng)的光束交替掃描樣品展開的通道區(qū)域，波長(zhǎng)選擇時(shí)，一個(gè)波長(zhǎng)為樣品最大吸收位置，另一是吸收極小值位置。如上圖所示，如檢測(cè)目標(biāo)為3(則最大吸收峰為290nm，極小值可選200nm、260nm或325nm)。這種方法可基本消除鋪板不均產(chǎn)生的誤差，因此掃描基線很穩(wěn)定。

以上各種掃描方式中，根據(jù)光源大小(掃描精度)不同可分為直線掃描和鋸齒掃描。

直線掃描:用可以覆蓋樣品展開通道的寬光束一次性掃完整個(gè)展開通道，即在展開方向上(圖中橫坐標(biāo))，每個(gè)點(diǎn)的數(shù)據(jù)只是一個(gè)掃描數(shù)據(jù)點(diǎn)。

鋸齒掃描:采用點(diǎn)狀光源，光點(diǎn)尺寸小于通道寬度，因此在展開方向移動(dòng)到任何一點(diǎn)時(shí)，光源都要逐點(diǎn)沿樣品通道方向掃描，即形成"之"形(或鋸齒形掃描)。這樣，在展開方向上每一點(diǎn)的數(shù)據(jù)都是多個(gè)點(diǎn)掃描結(jié)果的累加值。鋸齒掃描的精度相對(duì)直線掃描明顯提高。

當(dāng)前，在定量分析中，薄層掃描多采用雙波長(zhǎng)鋸齒掃描。

分析誤差

薄層分析的誤差包括三個(gè)方面:點(diǎn)樣誤差、展開誤差、定位誤差和檢測(cè)誤差。

采用自動(dòng)點(diǎn)樣器，誤差可控制在0.5%，熟練的分析人員用毛細(xì)管點(diǎn)樣，誤差小于1.0%，若用微量進(jìn)樣器，誤差會(huì)大一些。

展開誤差來(lái)自鋪板的均勻性和樣品展開效果，若采用預(yù)制的高效薄層板，誤差會(huì)明顯降低，采用雙波長(zhǎng)鋸齒掃描，也能有效降低展開誤差。

定位誤差值斑點(diǎn)的位置和大小判定，擴(kuò)散、脫尾等易產(chǎn)生定位誤差。檢測(cè)誤差來(lái)自光源的穩(wěn)定性、光檢測(cè)器的穩(wěn)定性以及樣品對(duì)光吸收(或熒光產(chǎn)生)的線性度等方面。為減少這些誤差，需要非常精密的機(jī)電系統(tǒng)，這也直接導(dǎo)致產(chǎn)品高昂的價(jià)格。

通常情況下，薄層掃描分析的誤差在3%以下。

薄層數(shù)碼成像分析技術(shù)是利用數(shù)碼成像設(shè)備獲得薄層板上各點(diǎn)的光強(qiáng)度信息，之后對(duì)獲得圖像進(jìn)行分析的薄層分析技術(shù)。數(shù)碼成像設(shè)備包括兩種:照相機(jī)和掃描儀(由于數(shù)碼掃描儀采用逐行成像技術(shù)，為便于區(qū)分傳統(tǒng)薄層掃描儀的逐點(diǎn)掃描，將數(shù)碼掃描儀稱為逐行掃描儀)。

和傳統(tǒng)薄層掃描一樣，照相機(jī)或逐行掃描儀都具有光檢測(cè)系統(tǒng)，它們都是將光量線性轉(zhuǎn)化為電信號(hào)的元件。不同的是，照相機(jī)和逐行掃描儀可進(jìn)一步將電信號(hào)轉(zhuǎn)換成電腦圖像，圖像中單個(gè)點(diǎn)(像素)的顏色深淺反映了光的強(qiáng)弱。

因此，薄層數(shù)碼成像更接近人眼觀察檢測(cè)，結(jié)果更直觀，因此非常適合鑒別，特別是中藥指紋圖譜的識(shí)別。

數(shù)碼成像儀不僅能完成普通白光照射下的成像分析，再裝配254nm或365nm紫外燈后，也可以檢測(cè)特異熒光，特異熒光檢測(cè)。

1.離心薄層色譜儀 2.棒狀薄層色譜儀 3.手動(dòng)薄層色譜儀 4.雙波長(zhǎng)薄層色譜掃描儀 5.全自動(dòng)薄層色譜儀 6.旋轉(zhuǎn)薄層色譜儀 7.全波長(zhǎng)薄層色譜儀 8.全能型薄層色譜儀 9.二極管陣列薄層色譜掃描儀 10.加壓薄層色譜儀 11.暗箱式薄層色譜攝影儀

薄層色譜，分離后的物質(zhì)通過(guò)直接觀察，或者染色處理后觀察，或者在紫外燈照射下觀察。其中紫外照射熒光觀察是最常用的方法。

但是薄層色譜法具有操作簡(jiǎn)單、快速，設(shè)備投資小、檢測(cè)運(yùn)行成本低等特點(diǎn)，在各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。