二硫腙比色法操作方法

1.樣品的消化:同"砷的測定"中硝酸-高氯酸-硫酸法或硝酸-硫酸法。

2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

吸取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml鋅標(biāo)準(zhǔn)使用液，分別置于125ml分液漏斗中，各加入C(HCl)=0.02mol/L鹽酸至20ml。漏斗中，備加c(HcL)=o.02M1兒鹽酸至20m1。然后分別加入10ml乙酸-乙酸鹽緩沖液、1m125%硫代硫酸鈉溶液，搖勻，再各加入10.0ml二硫腙使用液，劇烈振搖2min。靜置分層后，四氯化碳層經(jīng)脫脂棉濾入lcm比色杯中，以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長530nm處測定吸光度、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或求出回歸方程。

3.樣品溶液和試劑空白液油定

吸取5.0ml~10.0ml消化后定容的樣品溶液和相同量的試劑空白液，分別置于125m1分液漏斗中，加5m1水、0.5ml20%鹽酸羥胺溶液，搖勻，再加2滴酚紅指示劑，用1:1氨水調(diào)至紅色，再多加2滴。再加5ml 0.01%二硫腙-四氯化碳溶液，劇烈振搖2min，靜置分層。將四氯化碳層移入另一分液漏斗中，水層用少量二硫腙-四氯化碳溶液振搖提取，每次2mL~3ml，直至二硫腙-四氯化碳溶液綠色不變?yōu)橹?。合并提取液，?m1水洗滌，四氯化碳層用C(HCl)=0.02mol/L鹽酸提取2次，每次10ml，提取時(shí)劇烈振搖2min，合并C(HCl)=0.02mol/L鹽酸提取液，并用少量四氯化碳洗去殘留的二硫腙。以下自"加入l0ml乙酸-乙酸鹽緩沖溶液"起，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制操作方法進(jìn)行操作。根據(jù)測得吸光度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相當(dāng)于鋅的含量，或?qū)⑽舛却牖貧w方程求得鋅的含量。

分液漏斗、分光光度計(jì)。

1.C(CH3COONa)=2mol/L乙酸鈉溶液:稱取68g乙酸鈉(CH3COONa·3H2O)，加水稀釋至250ml。

2.C(CH3COOH)=2mol/L乙酸溶液:量取10.0ml冰乙酸，加水稀釋至85ml。

3.乙酸-乙酸鹽緩沖溶液C(CH3COONa)=2mol/L乙酸鈉溶液與C(CH3COOH)=2mol/L乙酸溶液等體積混合，此溶液PH為4.7左右。用0.01%二硫腙四氯化碳溶液提取數(shù)次，每次10ml，除去其中的鋅，至四氯化碳層綠色不變?yōu)橹?，棄去四氯化碳層，再用四氯化碳提取乙?乙酸鹽緩沖液中過剩的二硫腙，至四氯化碳層無色，棄去四氯化碳層。

4.1:1氨水。

5.C(HCl)=2mol/L鹽酸:最取10ml鹽酸，加水稀釋至60ml。

6.C(HCl)=0.02mol/L鹽酸:吸取1ml C(HCl)=2mol/L鹽酸，加水稀釋至100ml。

7.酚紅指示劑:0.1%乙醇溶液。

8.20%鹽酸羥胺溶液:稱取20g鹽酸羥胺，加60ml水，滴加1:1氨水，調(diào)節(jié)PH至4.0-5.5，以下操作同乙酸-乙酸鹽緩沖溶液的處理。然后加水稀釋至100ml。

9.25%硫代硫酸鈉溶液:用C(CH3COOH)=2mol/L乙酸溶液調(diào)節(jié)PH至4.0-5.5。以下按試劑3中用0.01%二硫腙-四氯化碳溶液，處理。

10.0.01%二硫腙-四氯化碳溶液。

11.二硫腙使用液:吸取1.0ml的二硫腙-四氯化碳溶液，加四氯化碳至10.0ml，混勻。用1cm比色杯，以四氯化碳調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長530nm處測吸光度(A)，用下式計(jì)算出配制100ml的二硫腙使用液(57%透光率)所需0.01%二硫腙-四氯化碳溶液毫升數(shù)(V)。

12.鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取0.1000g鋅，加10mlC(HCl)=2mol/L鹽酸，溶解后移入1000ml溶量瓶中，加水稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于100μg。

13.鋅標(biāo)準(zhǔn)使用液:吸取1.0ml鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于100ml的容量瓶中，加1mlC(HCl)=2mol/L鹽酸，以水稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于1μg鋅。

樣品經(jīng)消化后，在pH4.0~4.5時(shí)，鋅離子與二硫腙生成紫紅色配合物，溶于四氯化碳，與標(biāo)準(zhǔn)系列相比較進(jìn)行定量。

式中:

a1--測定用樣品消化液中鋅的含量(μg)

a0--試劑空白液中鋅的含量(μg);

m--樣品質(zhì)量(體積)[g(ml)];

V1--樣品消化波速體積(nII);

V2--測定用樣品消化液的體積(m1)。

1.測定時(shí)加入硫代硫酸鈉、鹽酸羥胺和在控制pH值的條件下，可防止銅、汞、鉛、鉍、銀和鎘等離子的干擾。并能防止二硫腙被氧化。

2.所用玻璃儀器用10%一20%硝酸浸泡24h以上，然后用不含鋅的蒸餾水沖洗潔凈。

3.硫代硫酸鈉是較強(qiáng)的配合劑，它不僅配合干擾金屬，同時(shí)也與鋅配合.所以只有使鋅從配合物中釋放出來，才能被二硫腙提取，而鋅的釋放又比較緩慢，因此必須劇烈根據(jù)2min。