梔子苷

■菌落總數(shù)按GB/4789.2-1994。

■大腸菌群按GB/4789.3-1994。

■霉菌和酵母按GB/4789.15-1994。

■致病菌按GB4789.4~5、10~11

梔子來源于茜草科Rubiaceae植物梔子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果實。梔子中含有40余種生理活性物質(zhì), 其中為國內(nèi)外所公認的中藥梔子有效成分為環(huán)烯醚萜類物質(zhì)。梔子所含的環(huán)烯醚萜類物質(zhì)包括梔子苷、京尼平苷、羥異梔子苷、梔子苷酸等,其中活性成分最高的是梔子苷和京尼平苷。梔子苷又是生產(chǎn)梔子藍、梔子紅、梔子紫的中間體和生藥品的有效單體。因此, 對梔子苷的分離、純化、結(jié)晶和含量測定成為對梔子深度開發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)。目前,對梔子苷的分離可以與α - 藏花素的分離同步進行。較為成熟的方法是采用大孔樹脂吸附解吸的技術(shù)。選用的樹脂多為弱極性和無極性, 如HP20、XAD22、HPD2100、X25 、NKA等等。文獻報道梔子苷的提純方法主要有: 鉛鹽沉淀法、活性炭除雜法、硅膠吸附法等。通過比較研究得出的初步結(jié)論是, 上述方法作為研究尚可,但無法進行工業(yè)化生產(chǎn)。其主要問題在于: 工藝復雜、物耗過大、收得率低, 而且大量使用有毒有害的試劑,如乙醚、氯仿、甲醇、丙酮、鉛鹽等。不符合食品、藥品的生產(chǎn)規(guī)范。而采用柱層析法則完全可以達到梔子苷純化的目的。選用安全、無毒、合適的固定相和流動相, 在一定的吸附量、溫度、pH、流速、流量等條件下, 可以有效地將梔子苷的含量由50%純化到95%左右, 為梔子苷的結(jié)晶創(chuàng)造必要的條件。梔子苷含量的測定方法有薄層紫外法 、薄層掃描法、高效液相色譜法等,薄層紫外法和薄層掃描法準確度不高, 高效液相色譜法是對梔子苷準確、快速的定量測定方法,為其質(zhì)量標準的制定。

IUPAC Name:methyl (1S)-7-(hydroxymethyl)-1-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-1,4a,5,7a-tetrahydrocyclopenta[c]pyran-4-carboxylate.

CAS號:24512-63-8

分子式:C17H24O10

分子量:388.3664

密度:1.49g/cm3

沸點:622.2°C at 760 mmHg

閃點:224°C

蒸汽壓:4.37E-18mmHg at 25°C

口感與氣味:無味

規(guī)格:10%-98%

顏色:本品低含量為棕黃色，高含量為白色，用藥時需注意。

溶解性:易溶于水，溶于乙醇，不溶于石油醚。

性狀:環(huán)烯醚萜苷類化合物，對α-萘酚、羥肟酸、三氯化鐵呈正反應。白色、類白色或淺黃色結(jié)晶。

藥理作用:梔子苷具有緩瀉、鎮(zhèn)痛、利膽、抗炎、治療軟組織損傷以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用。

方法名稱: 萬氏牛黃清心丸-梔子苷-高效液相色譜法

應用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測定萬氏牛黃清心丸中梔子苷的含量。

本方法適用于中成藥萬氏牛黃清心丸。

方法原理: 供試品加甲醇超聲，濾過，用高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長238nm處檢測梔子苷的吸收值，計算其含量。

試劑: 1. 甲醇(色譜純)

2. 乙腈(色譜純)

3.水為重蒸水

4.梔子苷對照品(中國藥品生物制品檢定所)

儀器設(shè)備: 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅膠鍵合硅膠為填充劑，Kromasil C18(250×4.6mm，5um)，理論板數(shù)按梔子苷計應符合規(guī)定。

1.3可變波長紫外檢測器

1.4 色譜工作站

1.5 超聲發(fā)生器

2 色譜條件

2.1 流動相:甲醇+乙腈=10+90

2.2流速:1.0ml/min

2.3檢測波長:238nm

2.4 柱溫:室溫

試樣制備: 1. 對照品溶液的制備

取梔子苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每毫升含0.298mg的溶液，即得對照品溶液。精密量取梔子苷對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，分別置于5ml 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2. 供試品溶液的制備

取本品10g，研細，過20目篩，精密稱取約1.2g，置于50mL具塞錐形瓶中，加甲醇25mL，密塞，稱定重量。超聲處理20min，放冷至室溫，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻。精密量取溶液10mL分別置于25mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得供試品溶液。

操作步驟: 1. 標準曲線的制備

精密吸取20ul，注入液相色譜儀，測定峰面積，以進樣量X為橫坐標，峰面積Y為縱坐標，繪制標準曲線?；貧w方程為:y=494747X-1511.3，r=0. 9997(n=5)，線性范圍為0.596-2.980mg。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀測定峰面積，外標法計算梔子苷的含量。

注:"精密稱取"系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。"精密量取"系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

參考文獻: 盧興紅，張?zhí)m桐，反相高效液相色譜法測定梔子及其制劑中梔子苷的含量，中國藥房，2003，14(12):748~750。