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做Elisa 用的96孔酶標(biāo)板是平底的好,還是尖底的好
平底的用來(lái)做ELISA的。尖底的沒(méi)有用過(guò),貌似是用來(lái)培養(yǎng)懸浮細(xì)胞配合96孔板離心機(jī)適配器來(lái)用的。
辣根過(guò)氧化物酶只能應(yīng)用于ELISA,對(duì)不?
辣根過(guò)氧化物酶用于ELISA的標(biāo)記用酶RP是一種分子量達(dá)44 000的糖蛋白,由無(wú)色的酶蛋白和深棕色的鐵卟啉結(jié)合而成,中性糖和氨基糖約占18%。每一個(gè)HRP分子中含一個(gè)氯化血紅素IX作輔基,...
國(guó)內(nèi)品牌elisa全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)廠家報(bào)價(jià)及保養(yǎng)方法
報(bào)價(jià)的話,最好自己去咨詢廠家。全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)保養(yǎng)方法主要注意以下三點(diǎn): 1.?平常不用時(shí),拔掉儀器電源插頭。? 2.每天洗板機(jī)工作結(jié)束時(shí),要對(duì)洗板機(jī)內(nèi)外進(jìn)行清潔,用濕抹布擦洗洗板機(jī)的外壁及載物臺(tái),以...
BV EIA、BV ELISA在檢測(cè)食蟹猴BV抗體中的比較研究
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本中心待出口美國(guó)、德國(guó)的 5 34份食蟹猴血清用國(guó)產(chǎn)BVEIA抗原檢測(cè)片檢測(cè)后送美國(guó)BioReilance公司進(jìn)行檢測(cè)。 5 34份血清中 ,11分為陽(yáng)性 ,5份為可疑 ,5 18份為陰性。經(jīng)美國(guó)復(fù)檢 5 14為陰性 ,8份為可疑 ,12份呈陽(yáng)性。兩者的檢測(cè)符合率達(dá) 95 9% ,說(shuō)明BVEIA檢測(cè)準(zhǔn)確度已達(dá)到國(guó)際檢測(cè)水平 ,可為國(guó)內(nèi)獼猴生產(chǎn)單位控制BV檢測(cè)質(zhì)量提供有力的技術(shù)保證。
阻斷ELISA與病毒中和試驗(yàn)檢測(cè)PPR抗體的比較分析??
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為選擇一種簡(jiǎn)便、快速、敏感性高、特異性好的小反芻獸疫(PPR)血清學(xué)檢測(cè)方法,本實(shí)驗(yàn)收集了506份山羊和綿羊血清樣品,采用ELISA和病毒中和試驗(yàn)(VNT)兩種方法對(duì)PPR病毒(PPRV)抗體進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示ELISA和VNT檢出的陽(yáng)性率分別為44.9%和48.6%。兩種方法的符合率Kappa值為0.925,表明這兩種方法具有較高的一致性,但ELISA更簡(jiǎn)便、快速、敏感,更便于基層單位使用。本研究為PPR血清流行病學(xué)調(diào)查及疫苗免疫效果評(píng)價(jià)方法的選擇提供相關(guān)的技術(shù)參數(shù)。
這兩種引物分別稱為限制性引物與非限制性引物;其最佳比例一般為1:50~1:100,關(guān)鍵是限制引物的絕對(duì)量。限制性引物太多太少,均不利于制備ss-DNA。也可用普通PCR制備靶DNA雙鏈DNA(ds-DNA),再以ds-DNA為模板,只用其中一種過(guò)量引物進(jìn)行單引物PCR制備ss-DNA。
產(chǎn)生的ds-DNA與ss-DNA由于分子量不同可以在電泳中分開(kāi),而得到純ss-DNA。
不對(duì)稱PCR主要為測(cè)序制備ss-DNA,尤為用c-DNA經(jīng)不對(duì)稱PCR進(jìn)行DNA序列分析是研究真核DNA外顯子的好方法。
梯度PCR儀除具標(biāo)準(zhǔn)PCR儀功能外,其梯度模塊還能同時(shí)進(jìn)行多個(gè)不同退火溫度的PCR反應(yīng),在梯度模塊上,可實(shí)現(xiàn)對(duì)梯度溫度和梯度寬度等參數(shù)的調(diào)整,自由編程溫度,梯度實(shí)現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時(shí)進(jìn)行熱循環(huán)。僅一次實(shí)驗(yàn)就能確定特定體系相應(yīng)的最優(yōu)退火溫度。從而可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,大大提高PCR科研效率。
RT- PCR首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用以RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR技術(shù)靈敏而且用途廣泛,可用于檢測(cè)細(xì)胞中基因表達(dá)水平、細(xì)胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作為模板的RNA可以是總RNA、mRNA或體外轉(zhuǎn)錄的RNA產(chǎn)物。無(wú)論使用何種RNA,關(guān)鍵是確保RNA中無(wú)RNA酶和基因組 DNA的污染。
用于反轉(zhuǎn)錄的引物可視實(shí)驗(yàn)的具體情況選擇隨機(jī)引物、Oligo dT 及基因特異性引物中的一種。對(duì)于短的不具有發(fā)卡結(jié)構(gòu)的真核細(xì)胞mRNA,三種都可。