二羥黃酮

目的 觀察3，6-二羥黃酮對重組人蛋白激酶CK2全酶的直接作用及其酶動(dòng)力學(xué)機(jī)制，尋找CK2的抑制制。方法 以重組人CK2全酶為分子靶點(diǎn)，檢測不同濃度3，6-二羥黃酮對CK2活性的影響，并通過酶的動(dòng)力學(xué)分析其抑制作用機(jī)制。CK2活性通過測定轉(zhuǎn)移到CK2底物上的[γ-^32P]ATP的[^32P]放射活度來檢測。結(jié)果 重組人CK2與天然CK2的性質(zhì)完全一致。3，6-二羥黃酮對重組人CK2全酶具有較強(qiáng)的抑制作用，IC50為13.93μmol·L^-1;進(jìn)一步分析，它與ATP呈競爭性抑制CK2的活性，抑制常數(shù)Ki值為10.67μmol·L^-1;與酪蛋白呈以非競爭性為主的混合性抑制CK2的活性，抑制常數(shù)Ki值為17.34μmol·L^-1。結(jié)論 3，6-二羥黃酮是一種重組人蛋白激酶CK2的抑制劑。重組人CK2可作為一種較為簡便地篩選和開發(fā)有效的CK2抑制劑的分子靶點(diǎn).

黃酮類化合物泛指兩個(gè)具有酚羥基的苯環(huán)(A-與B-環(huán))通過中央三碳原子相互連結(jié)而成的一系列化合物黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中常連接有酚羥基、甲氧基、甲基、異戊烯基等官能團(tuán)。此外，它還常與糖結(jié)合成苷。 多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為黃酮的基本骨架是由三個(gè)丙二酰輔酶A和一個(gè)桂皮酰輔酶A生物合成而產(chǎn)生的。經(jīng)同位素標(biāo)記實(shí)驗(yàn)證明了A環(huán)來自于三個(gè)丙二酰輔酶A，而B環(huán)則來自于桂皮酰輔酶A[1]。

1、分類:

根據(jù)中央三碳鏈的氧化程度、B-環(huán)連接位置(2-或3-位)以及三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀等特點(diǎn)，可將主要的天然黃酮類化合物分類:黃酮類(flavones)、黃酮醇(flavonol)、二氫黃酮類(flavonones)、二氫黃酮醇類(flavanonol)、花色素類(anthocyanidins)、黃烷-3，4二醇類(flavan-3,4-diols)、雙苯吡酮類(xanthones)、查爾酮(chalcones)和雙黃酮類(biflavonoids)等十五種。另外，還有一些黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)很復(fù)雜，其中包括榕堿及異榕堿等生物堿型黃酮。

2、理化性質(zhì):

天然黃酮類化合物多以苷類形式存在 ，并且由于糖的種類、數(shù)量、聯(lián)接位置及聯(lián)接方式不同可以組成各種各樣黃酮苷類。組成黃酮苷的糖類包括單糖、雙糖、三糖和?；恰｜S酮苷固體為無定形粉末，其余黃酮類化合物多為結(jié)晶性固體。 黃酮類化合物不同的顏色為天然色素家族添加了更多色彩。這是由于其母核內(nèi)形成交叉共軛體系，并通過電子轉(zhuǎn)移、重排，使共軛鏈延長，因而顯現(xiàn)出顏色。黃酮苷一般易溶于水、乙醇、甲醇等極性強(qiáng)的溶劑中;但難溶于或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中。糖鏈越長則水溶度越大。黃酮類化合物因分子中多具有酚羥基，故顯酸性。酸性強(qiáng)弱因酚羥基數(shù)目、位置而異。

3、顯色:

1.鹽酸-鎂粉(或鋅粉)反應(yīng)為鑒定黃酮類化合物最常用的顏色反應(yīng)，反應(yīng)機(jī)理現(xiàn)在認(rèn)為是因?yàn)樯闪岁柼茧x子緣故[1]。2.四氫硼鈉(NaBH4)是對二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑，產(chǎn)生紅~紫色。而與其它黃酮類化合物均不顯色。3. 黃酮類化合分子中常含有下列結(jié)構(gòu)單元，故?？膳c鋁鹽、鉛鹽、鋯鹽、鎂鹽、鍶鹽、鐵鹽等試劑反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。與1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液反應(yīng)，生成的絡(luò)合物多為黃色(λmax=415nm)，并有熒光，可用于定性及定量分析。

4、黃酮對身體的好處

黃酮廣泛存在自然界的某些植物和漿果中,總數(shù)大約有4千多種,其分子結(jié)構(gòu)不盡相同,如蕓香苷、橘皮苷、櫟素、綠茶多酚、花色糖苷、花色苷酸等都屬黃酮。不同分子結(jié)構(gòu)的黃酮可作用于身體不同的器官，如山楂--心血管系統(tǒng)，蘭梅--眼睛，酸果--尿路系統(tǒng)，葡萄--淋巴、肝臟，接骨木果--免疫系統(tǒng)，平時(shí)我們可以通過多食葡萄、洋蔥、花椰萊、喝紅酒、多飲綠茶等方式來獲得黃酮，作為身體的一種補(bǔ)充。

黃酮的功效是多方面的，它是一種很強(qiáng)的抗氧劑，可有效清除體內(nèi)的氧自由基，如花青素、花色素可以抑制油脂性過氧化物的全階段溢出，這種阻止氧化的能力是維生素E的十倍以上，這種抗氧化作用可以阻止細(xì)胞的退化、衰老，也可阻止癌癥的發(fā)生。

黃酮可以改善血液循環(huán)，可以降低膽固醇，向天果中的黃酮還含有一種PAF抗凝因子，這些作用大大降低了心腦血管疾病的發(fā)病率，也可改善心腦血管疾病的癥狀。

被稱為花色苷酸的黃酮化合物在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中被證明可以降低26%的血糖和39%的三元脂肪酸丙酯，這種降低血糖的功效是很神奇的，但更重要的是它對穩(wěn)定膠原質(zhì)的作用，因此它對糖尿病引起的視網(wǎng)膜病及毛細(xì)血管脆化有很好的作用。

黃酮可以抑制炎性生物酶的滲出，可以增進(jìn)傷口愈合和止痛，櫟素由于具有強(qiáng)抗組織胺性，可以用于各類敏感癥。

一項(xiàng)由荷蘭專家主持的研究發(fā)現(xiàn):由4807位參與者的實(shí)驗(yàn)表明,每天飲375毫升綠茶的人，其心臟病的發(fā)病概率是那些不喝茶的人的一半;致命性心臟病發(fā)病率只有三分之一。其中重要的原因就是綠茶中所含的黃酮(>2002.4.25)。

來自南太平洋島國的向天果，富含33種類黃酮，可以幫助人體改善血液循環(huán)，提高免疫力，是糖尿病、高血脂、高血壓患者的福音。蜂膠是蜂蜜從植物新生枝芽或樹皮上采集的樹膠，混以自身分泌加工而成的芳香膠狀體。4-5萬只蜜蜂，一年僅能采到40g-60g左右的蜂膠，被譽(yù)為"紫色黃金"。蜂膠皇是蜂膠中的極品，其總黃酮含量高達(dá)9300mg以上，且其余成份黃金配比，協(xié)同作用?？茖W(xué)家們給予蜂膠皇許多美稱:血管清道夫、血糖守護(hù)神、抗癌勇士、天然免疫增強(qiáng)劑

蜂膠中黃酮的化學(xué)成分

由于蜜蜂所采蜂膠的膠源植物品種，生境及采集季節(jié)不同，致使它所含的各種成分常有一定差別，從蜂箱中收集的蜂膠，通常含有55%的樹脂和樹香、30%左右的蜂蠟、10%的芳香揮發(fā)油和5%的花粉及夾雜物。20世紀(jì)70年代后，有關(guān)專家經(jīng)過分析化驗(yàn)，證明蜂膠所含成分極其復(fù)雜，有黃酮類化合物、酸、醇、酚、醛、酯、醚類以及烯、萜、甾類化合物和多種氨基酸、脂肪酸、酶類、維生素、多種微量元素等。

1黃酮類化合物

目前，已從蜂膠中分離出20多種黃酮化合物，它是蜂膠中的主要活性物質(zhì)約占蜂膠的4.13%。這些黃酮化合物包括黃酮類、黃酮醇類和雙氫黃酮類等。屬于黃酮類的有白楊素、楊芽黃素、刺槐素、芹菜素、柳穿錢素等;屬于黃酮醇類的有良姜素、高良姜素、鼠李素、異鼠李素、鼠李檸檬素、山奈素、岳樺素、槲皮素及其衍生物等，屬于雙氫黃酮類的有喬松素、松球素、櫻花素、異櫻花素、柚皮素等。

從蜂膠中首次發(fā)現(xiàn)了自然界中只有蜂膠中才有的獨(dú)特有效成分，5，7-二羥基-3`，4`-二甲基黃酮和5-羥基-4`，7-二甲氧基雙氫黃酮。

黃酮化合物是一類重要的并且在植物界分布很廣的天然化合物。藥理學(xué)試驗(yàn)證明，此類物質(zhì)中有許多具有很強(qiáng)的活性，對多種疾病有良好的療效，醫(yī)用價(jià)值甚高。

2酸類化合物

蜂膠中所含的酸類化合物有咖啡酸、茴香酸、對香豆酸、阿魏酸、異阿魏酸、桂皮酸、3，4-二甲氧基桂皮酸、苯甲酸、對羥基苯甲酸等。

3醇類化合物

桂皮醇、松柏醇、苯甲基、3，5-二甲氧基苯甲醇、2，5-二甲氧基苯甲醇、桉葉醇、a-樺木烯醇、乙酰氧基-2-樺木烯醇、甜沒藥萜醇、a-萜品醇、愈創(chuàng)木醇、a-布藜醇等。

4烯、萜類化合物

ß-蒎烯、a-蒎烯、△3蒈烯、a-詁鈀烯、a-雪松烯、ß-愈創(chuàng)木烯、a-依蘭油烯、杜松烯、鯊烯、異長葉烯、石竹烯、荇草烯等。

5酚、醛、酮、酯、醚類化合物

丁香酚、香美蘭醛、異香蘭醛、苯甲醛、ß-環(huán)檸檬醛、4，5-二甲基-4-苯-△²-環(huán)己烯酮、對香豆酸酯、咖啡酸酯、環(huán)己醇苯甲酸酯、環(huán)己二醇苯甲酸酯、松柏醇苯甲酸酯、對香豆醇苯甲酸酯、苯甲醇酸阿魏酸酯、苯乙烯醚、對甲氧基苯乙烯醚等。

6微量元素

經(jīng)現(xiàn)代科學(xué)分析確認(rèn)，蜂膠中含有約30種微量元素。其中有屬于常量元素的氧、氫、碳、氮、鈣、磷及生命必需的元素鋅、錳、銅、鈷、鉬、鐵、氟等。此外尚有鉀、鈉、鎂、硫、鋁、錫、硅、氯、砷、鈦、鉻、硒、鎳、鋇、鋯、銻等微量元素。

7其它成分

除上述6類成分外，蜂膠中還含有豐富的維生素B1、維生素PP、維生素A原和多種氨基酸、多糖以及淀粉酶、脂肪酶、組織蛋白酶、胰蛋白酶等酶類、脂肪酸、甾類化合物等。