透射電子顯微鏡制片技術(shù)
透射電子顯微鏡制片技術(shù) 其基本要求是:①盡可能保持材料的結(jié)構(gòu)和某些化學(xué)成分生活時的狀態(tài)。②材料的厚度一般不宜超過1000埃。組織和細(xì)胞,必須制成薄切片,以獲得較好的分辨率和足夠的反差。③采用各種手段,如電子染色、投影、負(fù)染色等來提高生物樣品散射電子的能力,以獲得反差較好的圖像。
樣品制備的方法隨生物材料的類型以及研究目的而各有不同。對生物組織和細(xì)胞等,一般多用超薄切片技術(shù),將大尺寸材料制成適當(dāng)大小的超薄切片,并且利用電子染色、細(xì)胞化學(xué)、免疫標(biāo)記及放射自顯影等方法顯示各種超微結(jié)構(gòu)、各種化學(xué)物質(zhì)的部位及其變化。對生物大分子(蛋白質(zhì)、核酸)、細(xì)菌、病毒和分離的細(xì)胞器等顆粒材料,常用投影、負(fù)染色等技術(shù)以提高反差,顯示顆粒的形態(tài)和微細(xì)結(jié)構(gòu)。此外還有以冷凍固定為基礎(chǔ)的冷凍斷裂--冰凍蝕刻、冷凍置換、冷凍干燥等技術(shù)。
掃描電子顯微鏡樣品制備技術(shù)
掃描電子顯微鏡樣品制備技術(shù) 掃描電鏡以觀察樣品的表面形態(tài)為主。掃描電鏡樣品的制備,必須滿足以下要求:①保持完好的組織和細(xì)胞形態(tài)。②充分暴露欲觀察的部位。③良好的導(dǎo)電性和較高的二次電子產(chǎn)額。④保持充分干燥的狀態(tài)。
某些含水量低且不易變形的生物材料,可以不經(jīng)固定和干燥而在較低加速電壓下直接觀察,如動物毛發(fā)、昆蟲、植物種子、花粉等,但圖像質(zhì)量差,而且觀察和拍攝照片時須盡可能迅速。對大多數(shù)的生物材料,則應(yīng)首先采用化學(xué)或物理方法固定,脫水和干燥,然后噴鍍碳與金屬以提高材料的導(dǎo)電性和二次電子產(chǎn)額。
電子顯微鏡的分類 1、透射電鏡 (TEM) 樣品必須制成電子能穿透的,厚度為100~2000 ?的薄膜。成像方式與光學(xué)生物顯微鏡相似,只是以電子透鏡代替玻璃透鏡。放大后的電子像在熒光屏上顯示出來,TE...
電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理,用電子束和電子透鏡代替光束和光學(xué)透鏡,使物質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像的儀器。 電子顯微鏡的分辨能力以它所能分辨的相鄰兩點的最小間距來表示。20世紀(jì)70年代,透射...
顧名思義,所謂電子顯微鏡是以電子束為照明光源的顯微鏡。由于電子束在外部磁場或電場的作用下可以發(fā)生彎曲,形成類似于可見光通過玻璃時的折射現(xiàn)象,所以我們就可以利用這一物理效應(yīng)制造出電子束的“透鏡”,從而開...
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頁數(shù): 1頁
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原子水平的表面特征傳感器—掃描式隧道電子顯微鏡(STM)
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頁數(shù): 3頁
評分: 4.5
用掃描電子顯微鏡(SEM)對PS版鋁板基上的砂目形貌進行了觀察分析,比較了不同砂目形貌對PS版性能的影響。實踐證明,SEM可以方便直觀地觀察鋁板基上砂目的細(xì)密程度、平臺和深度,為砂目的處理提供客觀可靠的依據(jù)。
本書介紹電子顯微鏡的電子光學(xué)基本原理,包括磁透鏡、高斯光學(xué)、象差和分辨本領(lǐng)等問題,并在此基礎(chǔ)上,探討了透射電鏡和掃描電鏡各部分的電子光學(xué)設(shè)計原則.書中著重闡明電鏡的基本原理和設(shè)計原則,同時也涉及研制和使用電鏡中的一些實際問題,并介紹了國內(nèi)外關(guān)于電鏡方面的新發(fā)展.
本書可供從事電子顯微鏡方面工作的科技人員,高等學(xué)校有關(guān)專業(yè)的教師、研究生和高年級學(xué)生閱讀參考.
制備直接樣品的方法有很多,但一般情況下,總的制作過程都分為如下幾步:
(1)初減薄——制備厚度約100~200μm的薄片;
(2)從薄片E切取f3 mm的圓片;
(3)預(yù)減薄——從圓片的一側(cè)或兩側(cè)將圓片中心區(qū)域減薄至數(shù)腳;
(4)終減薄.
1.初減薄——由塊狀樣品制備薄片
對延性材料,如金屬,為避免對材料的機械損傷(例如為了研究材料中缺陷的結(jié)構(gòu)及密度),通常采用電火花線切割法從塊狀樣品上獲得厚度約200 μm的薄片.此外,也可以將材料軋制為薄片,再通過退火消除軋制缺陷.對某些脆性材料(例如Si、GaAs、NaCl、MgO),可用刀片將其沿解理面解理,重復(fù)解理直至達(dá)到對電子透明的程度.如要使薄片不與解理面平行,可采用金剛鋸.另外還有一些特殊的方法,如用水作溶劑通過線鋸切割巖鹽.此外,還可以用超薄切片機從塊狀樣品上切取可以直接供透射電鏡觀察的樣品.
2.圓片切取
如果材料的塑性較好且對機械損傷的要求不很嚴(yán)格,可采用特制的小型沖床從薄片上直接沖取f3mm的圓片.對脆性材料,有3種基本方法可供選用,即電火花切割、超聲波鉆和研磨鉆.電火花切割用于導(dǎo)體材料,后兩種常用于陶瓷和半導(dǎo)體材料.
3.預(yù)減薄
預(yù)減薄的目的在于使圓片的中心區(qū)域進一步減薄,以確保最終在圓片的中心部位穿孔(其邊緣附近區(qū)域可供觀察).預(yù)減薄通常采用專用的機械研磨機,使中心區(qū)域減薄至約10μm厚,借助于微處理器控制的精密研磨有時可以獲得使電子束透明的厚度(<1μm).有時也用化學(xué)方法進行預(yù)減?。?
4.終減薄
常用的終減薄方法有兩種,即電解拋光和離子轟擊.電解減薄只能用于導(dǎo)電樣品,其特點是快捷和不產(chǎn)生機械損傷,所以被廣泛用于金屬和合金樣品制備,電解減薄裝置。離子減薄適用于難熔金屬、硬質(zhì)合金和不導(dǎo)電材料的樣品制備,此法設(shè)備復(fù)雜,減薄時間也較長,且減薄后期階段難于掌握離子減薄裝置。
目錄
第一章 電子顯微鏡發(fā)展簡史
第二章 電子光學(xué)基礎(chǔ)
第三章 常用磁透鏡的傍軸光學(xué)參數(shù)
第四章 磁透鏡的象差
第五章 強激勵透鏡和非對稱透鏡
第六章 透鏡磁路與線包的設(shè)計
第七章 電子槍
第八章 偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)
第九章 照明系統(tǒng)和成象系統(tǒng)
第十章 象的觀察與記錄
第十一章 成象理論初步
第十二章 改善分辨本領(lǐng)的努力
第十三章 分析電子顯微鏡
第十四章 掃描透射電子顯微鏡
第十五章 全息法
參考文獻(xiàn)
附錄 商品電子顯微鏡發(fā)展簡史