磷酸緩沖液濃度計算

通常所說的磷酸緩沖液的濃度是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度，而不是鈉離子(Na+)或者鉀離子(K+)的濃度。正是因為如此，在配制中性緩沖液時，用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影響磷酸根離子的濃度，所得的緩沖液濃度仍是等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液原來的濃度，但是緩沖液中的鈉離子(Na+)或者鉀離子(K+)的濃度已經發(fā)生變化。

磷酸緩沖液的緩沖pH值范圍非常廣泛，可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液，配制酸性緩沖液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范圍在1-5;堿性緩沖液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范圍在9-12;中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5-8.5。

磷酸緩沖液PH5.7--8.0(0.2M)

甲液:

NaH2PO4·2H2O:Mr=156.03，0.2mol/L溶液為31.21g/L，

NaH2PO4·H2O:Mr=138.01，0.2mol/L溶液為27.6g/L。

乙液:

Na2HPO4·2H2O:Mr=178.05，0.2mol/L溶液為35.61g/L，

Na2HPO4·7H2O:Mr=268.13，0.2mol/L溶液為53.624 g/L ，

Na2HPO4·12H2O:Mr=358.22，0.2mol/L溶液為71.64g/L。

磷酸緩沖液PH5.7--8.0(0.2M)

PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)

5.7 93.5 6.5 6.9 45 55

5.8 92 8 7.0 39 61

5.9 90 10 7.1 33 67

6 87.7 12.3 7.2 28 72

6.1 85 15 7.3 23 77

6.2 81.5 18.5 7.4 19 81

6.3 77.5 22.5 7.5 16 84

6.4 73.5 26.5 7.6 13 87

6.5 68.5 31.5 7.7 10.5 89.5

6.6 62.5 37.5 7.8 8.5 91.5

6.7 56.5 43.5 7.9 7 93

6.8 51 49 8.0 5.3 94.7

根據要求的PH值,取X毫升甲液與Y毫升乙液,混合均勻即得.

磷酸緩沖液PH4.49--9.18(1/15M)

PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)

4.4 90 10 6.98 64

4.9 4 0. 1 9.9 7.71 7 3

5.29 0.25 9.75 7.58 8 2

5.59 0.5 9.5 7.75 9 1

5.91 1 9 8.04 9.5 0.5

6.24 2 8 8.2 9.7 0.3

6.47 3 7 8.54 9.75 0.25

6.64 4 6 8.68 9.9 0.1

6.81 5 5 9.18 10 0

乙液:一水磷酸二氫鈉,1/15M溶液含9.2g/L

甲液:二水磷酸氫二鈉,1/15M溶液含11.864g/L

根據要求的PH值,取X毫升甲液與Y毫升乙液,混合均勻即得.

PBS(Phosphate Buffered Saline)，可用PB磷酸鹽緩沖液加入NaCl或者KCl進行配制，譯名為磷酸鹽緩沖生理鹽水,也經常被人叫做磷酸鹽緩沖液，主要用于細胞實驗，NaCl，KCl的作用為調節(jié)滲透壓。簡稱:PB或者PB緩沖液

只要知道緩沖對的PH值，和要配制的緩沖液的pH值(及要求的緩沖液總濃度)，就能按公式計算[鹽]和[酸]的量。這個算法涉及對數換算，較麻煩，前人為減少后人的計算麻煩，已為我們總結出pH值與緩沖液對離子用量的關系并列出了表格。只要我們知道要配制的緩沖液的pH，經查表便可計算出所用緩沖劑的比例和用量。例如配制500nm pH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。

經查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L)，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配制100ml 0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。

計算好后，按計算結果準確稱好固態(tài)化學成分，放于燒杯中，加少量蒸餾水溶解，轉移入50ml容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻，就能得到所需的緩沖液。

各種緩沖溶液的配制，均按表格按比例混合，某些試劑，必須標定配成準確濃度才能進行，如醋酸、氫氧化鈉等。另外，所有緩沖溶劑的配制計量都能從以上的算式準確獲得。