酶切

1.應(yīng)使用消毒溶液及戴無菌手套以免DNA降解。

2.在Falcon試管中用1×TE溶液漂洗凝膠塊20min 3次，以去除EDTA。

3.混合:酶反應(yīng)緩沖液(高、中或低鹽緩沖液)，100

mmol/L亞精胺(只用于高鹽緩沖液狀態(tài))，10~20單位的內(nèi)切酶。20單位的內(nèi)切酶就足以過夜完全消化10μg DNA。

4.設(shè)立一個除內(nèi)切酶成分外含有混合物各組分的陰性對照，以檢查是否有非特異性DNA降解。

5.將瓊脂糖凝膠塊加入反應(yīng)混合溶液中:通常用消毒過的手術(shù)刀或套環(huán)將凝膠塊移入。

6.若兩種內(nèi)切酶所需緩沖液條件一致，可以同時或先后用兩種不同的酶進(jìn)行消化(先用低鹽緩沖液的酶消化，再調(diào)整鹽濃度)。倘若首次消化的酶要求50℃條件，在第二個酶消化時要換緩沖液。

7.若要進(jìn)行部分消化，則首先在同一溫度和反應(yīng)時間用1:10稀釋的酶進(jìn)行嘗試。

酶是一種具有特殊催化作用的蛋白質(zhì)。新鮮膠乳中的酶有些是固有的，有些是由細(xì)菌后來分泌的?，F(xiàn)已知的膠乳酶有凝固酶、氧化酶、過氧化酶、還原酶、蛋白酶、磷脂分解酶等多種、其中，凝固酶促使膠乳凝固，氧化酶使類胡蘿卜素氧化而顏色變深，蛋白酶則使蛋白質(zhì)分解成氨基酸，等等。制膠工業(yè)可以根據(jù)膠乳酶的特性而更好地加以控制和利用。

其主要成分堿性脂肪酶，應(yīng)用到造紙工業(yè)。

一、直接分解廢紙上的油墨、涂料及色料 (toner) ，達(dá)成脫墨效果;二、去除紙漿中的樹脂(pitch) 。

生物酶法脫墨劑和化學(xué)脫墨劑相比，操作簡便，工藝簡化?；瘜W(xué)法脫墨需要往碎漿機(jī)內(nèi)加脫墨劑、NaoH、熬合劑和其他化學(xué)品，而酶法脫墨只需在碎漿機(jī)加少量NaoH和生物脫墨劑生物酶脫墨劑的優(yōu)點(diǎn):

直接降低脫墨成本，綜合成本優(yōu)勢明顯;

o 生物酶脫墨條件溫和，化學(xué)品用量少，纖維損失小，保持良好的纖維特性;

o 大幅度降低污水COD和BOD，有利于環(huán)保，減輕污水處理能力;

o 有效處理膠粘物問題，提高紙機(jī)運(yùn)行效率;

o 不用或少用硅酸鈉燒堿等化學(xué)品，防止管道結(jié)垢;

o 明顯提高紙漿得率及提高紙張強(qiáng)度;

o 清潔生產(chǎn)，節(jié)省能源，降低物耗

o 使用簡單，適應(yīng)現(xiàn)在大多數(shù)脫墨工藝

配合化學(xué)脫墨劑使用，能顯著增強(qiáng)脫墨處理能力，并能降低10%-15%的堿用量。