電泳分析儀基本原理

物質(zhì)分子在正常情況下一般不帶電，即所帶正、負電荷量相等，不顯示帶電性。但是在一定的物理作用或化學(xué)反應(yīng)條件下，某些物質(zhì)分子會成為帶電的粒子。利用帶電粒子因帶電性質(zhì)、顆粒形狀、大小及所帶電量不同會導(dǎo)致移動速度及方向也不同的性質(zhì)，實現(xiàn)對樣本中不同成分的分離和分析。

根據(jù)自動化程度不同分為：半自動電泳和全自動電泳。

根據(jù)用途不同分為：蛋白電泳、核酸電泳等。

根據(jù)原理不同分為：等速電泳、等電聚焦電泳、免疫電泳等。

根據(jù)電泳中是否使用支持介質(zhì)分為：自由電泳和區(qū)帶電泳。

電泳分析儀1. 紙電泳

紙電泳（Paper Electrophoresis，PE）指用濾紙作為支持介質(zhì)的電泳方法，是最早使用的區(qū)帶電泳。在對某些蛋白質(zhì)(如糖蛋白、脂蛋白等)的分離尤其對氨基酸混合物的分離非常有效。

將濾紙條水平架設(shè)在兩個裝有緩沖溶液的容器之間，樣品點于濾紙中央。當(dāng)濾紙條被緩沖液潤濕后，再蓋上絕緣密封罩，即可由電泳電源輸入直流電壓（100V~1000V）進行電泳。

電泳分析儀2. 醋酸纖維素薄膜電泳

醋酸纖維素薄膜電泳的特點是分離速度快、電泳時間短、樣本用量少，特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測，廣泛用于分離和測定血清蛋白、血紅蛋白、糖蛋白、結(jié)合球蛋白、脂蛋白、同工酶等的臨床醫(yī)學(xué)檢驗。電泳時經(jīng)過膜的預(yù)處理、加樣、電泳、染色、脫色與透明即可得到滿意的分離效果。

電泳分析儀3. 凝膠電泳

凝膠電泳（Gel Electrophoresis）是由區(qū)帶電泳派生出的一種用凝膠物質(zhì)作為支持物的電泳方式。常用的凝膠為葡萄糖、交聯(lián)聚丙烯酰胺和瓊脂糖。這種介質(zhì)具有多孔性，有類似于分子篩的作用，流經(jīng)凝膠的物質(zhì)可按分子的大小逐一分離，因此廣泛用于測定蛋白質(zhì)的分子量。

電泳分析儀4. 等電聚焦電泳

等電聚焦電泳（Isoelectric Focusing Electrophoresis，IFE）是一種利用有pH梯度的介質(zhì)，分離等電點不同的蛋白質(zhì)的電泳技術(shù)。將等電點不同的蛋白質(zhì)混合物加入有pH梯度的凝膠介質(zhì)中，在電場內(nèi)經(jīng)過一段時間后，各組分將分別聚焦在各自等電點相應(yīng)的pH值位置上，最后，樣品的各組分在各自的等電點聚焦成一條清晰而穩(wěn)定的窄帶。

電泳分析儀5. 等速電泳

等速電泳（Isotachophoresis，ITP）采用兩種不同濃度的電解質(zhì)組成，一種為前導(dǎo)電解質(zhì)，充滿整個毛細管柱；另一種為尾隨電解質(zhì)，置于一端的電泳槽中。前導(dǎo)電解質(zhì)的遷移率高于任何樣品組分，后者則低于任何樣品組分，被分離的組分按其不同的遷移率夾在中間，在強電場的作用下，各被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中移動，實現(xiàn)分離。

電泳分析儀6. 雙向凝膠電泳

雙向凝膠電泳又稱二維凝膠電泳，主要用于分離和分析混合的蛋白質(zhì)組分，是優(yōu)于其它方法能夠連續(xù)地在一塊膠上分離數(shù)千種蛋白質(zhì)的方法。

該方法第一向采用等電聚焦，根據(jù)復(fù)雜的蛋白質(zhì)成分中各個蛋白質(zhì)等電點不同，將蛋白質(zhì)進行分離。第二向采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳，按蛋白質(zhì)分子量的大小使其在垂直方向進行分離。其結(jié)果呈現(xiàn)為斑點狀。

電泳分析儀7. 免疫電泳

免疫電泳（Immunoelectrophoresis）是瓊脂平板電泳和雙向免疫擴散兩種方法的結(jié)合。將抗原樣本在瓊脂平板上先進行電泳，使其中的各種成份彼此分開，然后加入抗體做雙向免疫擴散，已分離的各抗原成分與抗體在瓊脂中擴散而相遇，在兩者比例適當(dāng)?shù)牡胤叫纬蓮?fù)合物，呈現(xiàn)出可見的沉淀弧。

電泳分析儀1. 電場強度

電場強度越大，電泳速度越快。但增大電場強度會引起通過介質(zhì)的電流強度增大，從而造成電泳過程中產(chǎn)熱過多，引起介質(zhì)溫度升高，影響電泳效果。降低電流可以減少產(chǎn)生熱量，但會延長電泳時間，減慢待分離生物大分子的擴散而影響分離效果。

電泳分析儀2. 溶液性質(zhì)

主要體現(xiàn)為樣本溶液的pH、離子強度和黏度等。pH影響帶電粒子的解離程度，決定物質(zhì)所帶凈電荷的多少。當(dāng)pH為蛋白質(zhì)的等電點時，蛋白質(zhì)所帶凈電荷為零，此時蛋白質(zhì)在電場中不會發(fā)生移動。

適合電泳的離子強度為0.02-0.2。離子強度過高，帶電顆粒會將溶液中與其電荷性相反的離子吸引在自己周圍形成離子擴散層，從而降低粒子的電泳遷移速度。離子強度過低，電泳遷移速度會因為溶液pH變化而受到影響。

電泳分析儀3. 溫度

溫度過高引起樣本分離帶加寬；溫度過高產(chǎn)生對流，易引起待分離物的混合；對熱敏感樣本易引起蛋白質(zhì)變性；導(dǎo)致介質(zhì)黏度降低、電阻下降，影響電泳效果。

電泳分析儀4. 電滲

電滲是指電泳過程中液體對固體的相對移動。如果電滲方向與待分離分子電泳方向相同，則電泳速度加快，反之則減慢。

電泳分析儀5. 支持介質(zhì)

支持介質(zhì)的篩孔具有分子篩的作用，能夠分離分子。其大小對待分離生物大分子的電泳速度有明顯影響。篩孔大的介質(zhì)中，電泳速度快，反之則慢。此外，只是介質(zhì)的黏性可阻礙泳動，起到吸附作用。

電泳法可分為自由電泳（無支持體）及區(qū)帶電泳（有支持體）兩大類。

自由電泳包括Tise-leas式微量電泳、顯微電泳、等電聚焦電泳、等速電泳及密度梯度電泳。

區(qū)帶電泳則包括濾紙電泳（常壓及高壓）、薄層電泳（薄膜及薄板）、凝膠電泳（瓊脂、瓊脂糖、淀粉膠、聚丙烯酰胺凝膠）等。

1. 圓盤電泳槽：有上，下兩個電泳槽和帶有鉑金電極的蓋。上槽中具有若干孔，孔不用時，用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插電泳管（玻璃管）的硅橡皮塞。電泳管的內(nèi)徑早期為5～7mm，為保證冷卻和微量化，現(xiàn)在則越來越細。

2. 垂直板電泳槽：垂直板電泳槽的基本原理和結(jié)構(gòu)與圓盤電泳槽基本相同。差別只在于制膠和電泳不在電泳管中，而是在兩塊垂直放置的平行玻璃板中間。

3. 水平電泳槽：水平電泳槽的形狀各異，但結(jié)構(gòu)大致相同。一般包括電泳槽基座，冷卻板和電極。

要了解電泳整流器首先要了解什么是電泳

電泳是電泳涂料在陰陽兩極，施加于電壓作用下，帶電荷之涂料離子移動到陰極，

并與陰極表面所產(chǎn)生之堿性作用形成不溶解物，沉積于工件表面。